人脐带间充质干细胞不同分离方法的比较

来源 :全国第二十三届烧伤专业委员会学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:litho
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  目的 对比分析分离人脐带间充质干细胞(MSCs)常用方法 的效果,筛选比较高效的分离方法 。方法 采集足月剖腹产手术胎儿的脐带组织(n=15),充分洗涤后去除3条脐血管及脐带外膜,将其剪碎至1mm3的组织块,洗涤离心确定组织块的总体积,随机分为4组,分别采用组织块法和单纯胶原酶Ⅱ消化法、胶原酶Ⅱ+胰蛋白酶消化法、胶原酶Ⅱ+透明质酸酶消化法,分离获得人脐带MSCs,行台盼蓝染色计数细胞;倒置相差显微镜观察细胞形态;使用免疫荧光染色检测细胞表面标志物CD105、CD90、CD73、CD31、CD44、CD45、人类白细胞抗原1(HLA-Ⅰ)和人类白细胞抗原Ⅱ类分子(HLA-DR)的表达情况,进行细胞鉴定;噻唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖曲线。
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