【摘 要】
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以北美株PRRSV感染性克隆pCBC2为平台进行反向遗传操作,将3UTR中的一级结构进行了系列缺失或插入突变,并改变二级结构中的一个保守的茎环结构,构建全长PRRSV突变体克隆,解析3
【机 构】
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中国农业科学院上海兽医研究所/中国动物卫生与流行病学中心上海分中心,动物传染病防治研究室农业部动物寄生虫病重点实验室,上海,200232
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会
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以北美株PRRSV感染性克隆pCBC2为平台进行反向遗传操作,将3UTR中的一级结构进行了系列缺失或插入突变,并改变二级结构中的一个保守的茎环结构,构建全长PRRSV突变体克隆,解析3UTR突变对病毒感染性的影响,旨在界定调控PRRSV 3UTR的启动子序列及二级结构,即复制过程中的最小调控元件。以空斑和Northern Blot来研究拯救后重组病毒的复制、转录和生长特性,发现重组病毒感染动力学与亲本病毒无可见差别。结果表明PRRSV 3UTR的5端可耐受一定数目的核苷酸的缺失(41nt)与插入(23nt)突变,但进一步9nt缺失造成保守的环结构突变后就使病毒失去了感染性。证明了这是3UTR中控制PRRSV复制过程的的必需序列及二级结构,为进一步解析PRRSV复制过程的调控元件奠定了基础。
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