减毒鸡白痢沙门氏菌?crpC79-13株的构建及其作为活疫苗对雏鸡免疫活性初步观察

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构建鸡白痢沙门氏菌C79-13株?crp基因缺失突变株,并将?crpC79-13作为活疫苗口服免疫雏鸡,对其免疫活性进行初步观察。首先,将含缺失320bp crp基因的重组自杀性质粒pRE?crp与C79-13进行接合转移,两步法筛选出无抗性标记的鸡白痢沙门氏菌C79-13株crp基因缺失突变株。crp基因缺失后,口服接种1日龄雏鸡其毒力较C79-13降低约10~3倍;雏鸡于4日龄口服免疫?crpC79-13(10~9CFU/只)不影响其胸腺、法氏囊、脾脏等免疫器官及平均日增重等正常生长发育(P>0.05);根据外周血淋巴细胞转化(MTT)试验、Griess法及血清IgG动态观察,初步测定雏鸡于接种后第2~3周体内免疫水平达到最高。结果表明,本研究成功构建了减毒鸡白痢沙门氏菌?crpC79-13株,缺失株毒力显著降低,免疫雏鸡保持了较好的免疫活性,为研制鸡沙门氏菌活疫苗奠定了基础。
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