【摘 要】
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目的 探讨人牙周膜成纤维细胞在感染状态下,热刺激对其核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)及骨保护素(OPG)表达的影响.材料方法 采用体外原代培养的人牙周膜成纤维细胞,
【机 构】
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口腔疾病研究国家重点实验室(四川大学)
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目的 探讨人牙周膜成纤维细胞在感染状态下,热刺激对其核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)及骨保护素(OPG)表达的影响.材料方法 采用体外原代培养的人牙周膜成纤维细胞,分别接种在35mm培养皿中进行实验.实验分为两组：一组细胞直接接受不同温度(39℃,43℃,47℃,50℃)的热刺激5min；另一组细胞预先接受10ng/ml E.coli LPS刺激24h,然后再接受不同温度的热刺激(39℃,43℃,47℃,50℃)5min.刺激结束后,将所有细胞转移至37℃孵箱中继续培养6小时,分别采用实时荧光定量PCR技术和ELISA法检测RANKL、OPG基因水平和蛋白水平的变化.结果 在细胞接受E.coli LPS预刺激24h的感染状态下行热刺激,RANKL、OPG的基因转录受到抑制,但是仍会在特定条件下诱导蛋白分泌.在低热(39℃)条件下, LPS占主导作用,RANKL分泌升高,OPG分泌下降,RANKL/OPG相对比值上升；当温度升高后(43℃和47℃),热刺激对LPS诱发的炎症反应产生抑制作用,RANKL分泌下降,OPG分泌升高,相对比值降低；当温度继续增高,超过一定限度(50℃)后,RANKL/OPG相对比值再次升高.结论 当细胞长期处于慢性低毒的感染环境中时,适当的热刺激不会引起RANKL/OPG相对比值上升,局部组织发生骨吸收的可能性较小,只有在低热或极高热条件下才有可能诱发局部组织发生骨吸收.
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