小鼠骨髓间充质干细胞体外定向诱导分化神经细胞的研究

来源 :中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十三届学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jxncjwt
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本文建立昆明小鼠骨髓间充质干细胞的分离、培养体系,并对其进行鉴定和定向诱导分化为神经细胞.采用贴壁培养法分离培养昆明小鼠的骨髓间充质干细胞(MSCs),通过相差倒置显微镜对其进行形态学特征观察;通过碱性磷酸酶(AKP)染色、Hoechst 33258染色、瑞士-姬姆萨复合染色检测MSCs的表形特征;通过β-ME诱导MSCs定向分化为神经样细胞,诱导后的细胞进行HE染色,观察其形态学特性;通过NF-200、NSE免疫荧光细胞化学方法对已分化的神经元样细胞进行鉴定和分化率分析.分离得到的MSCs为成纤维样细胞,可见多个核仁,AKP染色阳性率为93.2%±1.5%,β-ME诱导后,MSCs分化为多种表形的神经细胞与原代培养的小鼠全脑细胞的外形相似,诱导后的神经细胞NF-200、NSE免疫荧光细胞化学染色均呈阳性,NF-200阳性率为85.4%±1.8%,NSE阳性率为82.7%±2.1%.采用贴壁培养法能够成功分离和培养昆明小鼠的MSCs,分离得到的MSCs具有定向分化成多种神经细胞的能力.
其他文献
精子介导基因转移是以精子为载体,在受精时将外源目的基因导入卵母细胞,是目前转基因动物研究中简单而高效的方法学之一.本文论述了以ICR小白鼠为试验动物,用精子载体法制备转基因小鼠模型,并根据得到的结果分析讨论精子载体法制备转基因动物的可行性及优缺点.
小鼠乳腺原基中干细胞以及其他不同细胞类群的定位,对于乳腺发生发育模式以及有关机理的揭示具有重要意义.本文利用双色免疫荧光结合confacol显微扫描技术,应用Sca-1、Cytokeratin、Muc-1、CD34和CD10抗体对小鼠乳腺原基中干细胞以及不同细胞成分进行了定位,并用细胞流式技术进行了验证和分析.结果显示,Cytokeratin可以显示原基轮廓,以此为参照,Sca-1、Muc-1和C
本实验的目的是探讨初情期前母猪在长期的不同日粮能量水平饲养条件下,外周血清FSH、LH、GH、胰岛素及IGF-I浓度的变化规律。研究初情期前母猪在长期的不同日粮能量水平饲养后,垂体细胞悬浮液FSH、LH及GH的浓度差异。不同日粮能量水平及胰岛素对无血清培养的单层垂体细胞FSH、LH及GH释放能力的影响。本实验选用24头140日龄杜x长x大三元杂交母猪,分高、中、低三个能量水平实验组,进行为期20天
本文对影响家禽就巢的催乳素(PRL)的研究进展进行综述,以期从分子水平及内分泌变化探讨PRL对家禽就巢的调控.
基因印记是不遵循孟德尔遗传规律的一种依靠单亲传递某些遗传性状的现象,即某些等位基因呈亲缘依赖性表达,另一等位基因不表达或表达极弱.配子和早期胚胎形成期是甲基化印记擦除,建立和维持的关键窗口期,而此期恰为体外生产胚胎时卵母细胞和胚胎体外培养阶段,甲基化易受体外受精(in ivtro fertility IVF)、(in vivtro culuture IVC)精子显微注射(intracytoplas
本文对麋鹿耳皮肤成纤维细胞的分离、培养、纯化、生长特征和冷冻保护剂、冷冻程序筛选等进行了研究.通过组织块培养法获得麋鹿皮肤成纤维细胞,用胰酶轻度消化后,经3~4次传代可得到较纯的皮肤成纤维细胞;麋鹿染色体数目为2n=68,核型式为2(M)+64(A),XY(A,M);含10%NCS的DMEM培养基最适宜细胞生长;10%DMSO作冷冻保护剂,冷冻时先在4℃放置30 min,移入-20℃放置1.5 h
供体细胞和受体胞质的细胞周期对体细胞核移植的成功率有着至关重要的作用,通常认为G0/G1期的体细胞最适宜用作核移植的供体.为了在核移植过程中获得更多的G0/G1期供体细胞,本试验对麋鹿皮肤成纤维细胞进行不同汇合程度、血清饥饿不同时间以及(mimosine)不同剂量和时间的处理,利用流式细胞仪分析细胞周期.结果表明,100%汇合的细胞G0/G1期比例可达91.95%;血清饥饿处理24h后有89.42
脂肪组织内分泌功能的发现是近年内分泌学科领域的突破性进展之一.近期研究发现,在脂肪细胞分泌的脂肪细胞因子及蛋白质因子如瘦素、抵抗素、脂联素等.但是,这些研究在一定程度上均表现出某些不足,过分强调单个基因的作用而忽略了多基因的系统表达模式,转录谱的研究则存在实验技术单一的缺陷.用系统的观点和方法对脂肪组织相关基因研究,揭示脂肪细胞生长发育过程中脂肪组织基因表达调控的分子互作机制将是今后脂肪组织内分泌
本试验以卵母细胞解冻后形态正常率和成熟率为指标,筛选有效的间情期蓝狐卵母细胞OPS冷冻方法.比较了不同玻璃化液(EFS30、EFS40、EDFS30、EDFS40)对卵母细胞的冷冻保存效果,以及不同培养时间(0、24、48、72h)的卵母细胞在玻璃化液EDFS30中平衡不同时间(15、25、35、60s)后的冷冻保存效果.结果表明,经培养72h的蓝狐卵母细胞在玻璃化液EDFS30中平衡25s后冷冻
牛细胞核移植技术包括体细胞核移植和胚胎细胞核移植,基于现阶段细胞核移植技术产业化可能性研究,本文重点对牛胚胎细胞核移植技术的研究效率、影响因素、存在的问题和产业化前景进行前瞻性的综述.