半枝莲通过microRNA-200a干预肠道肿瘤EMT的研究

来源 :中华中医药学会中药实验药理分会第十二次学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuanCL19861125
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  目的:EMT(epithelial-mesenchymal transition)是上皮细胞来源的恶性肿瘤细胞获得间质细胞特性,从而产生肿瘤侵袭转移的初始过程.机体mciroRNA-200a 通过靶向阻遏转录因子ZEB(zinc finger E-box binding homeobox)翻译,并提高E-cadherin 水平,起到抑制肿瘤侵袭转移的作用.半枝莲有清热解毒、活血祛瘀、消肿抗癌之功,临床用于肿瘤疗效卓著.本文旨在研究半枝莲通过microRNA-200a 对肠道肿瘤EMT 的影响.方法:制备半枝莲乙醇提取物后,用MTT 实验研究半枝莲(1000μg/ml,500μg/ml,250μg/ml,125μg/ml,62.5μg/ml 和31.25μg/ml)对人肠道肿瘤细胞SW480 增殖的影响.用细胞划痕实验研究半枝莲对SW480 细胞迁移的影响.用Transwell 侵袭实验研究半枝莲对SW480 细胞侵袭的影响.用软琼脂克隆形成实验研究半枝莲对SW480 细胞转化的影响.用qRT-PCR 研究半枝莲对microRNA-200a 及β-catenin、ZEB1、ZEB2、E-cadherin、Vimentin等EMT 相关基因mRNA 表达水平的影响.结果:半枝莲乙醇提取物能显著抑制SW480 细胞增殖,该抑制作用具有浓度依赖性和时间依赖性,且1000μg/ml 的半枝莲对SW480 细胞增殖的抑制率达到了79.8%.终浓度为125 μg/ml、250 μg/ml 和500 μg/ml 的半枝莲乙醇提取物可以剂量依赖性地抑制SW480 细胞迁移水平、SW480 细胞Transwell 侵袭能力、SW480 细胞软琼脂克隆形成.半枝莲可以上调SW480 细胞中microRNA-200a、E-cadherin 的mRNA 表达水平,并下调Vimentin、β-catenin、ZEB1 和ZEB2 mRNA 的表达水平.结论:半枝莲能够显著抑制肠道肿瘤EMT,其机制在于通过增强microRNA-200a 表达,而抑制EMT 相关基因表达.
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