目的靶向程序性细胞死亡蛋白1 （PD-1）及其配体PD-L1的免疫检查点抑制剂（ICIs）的临床应用极大的改善了非小细胞肺癌（NSCLC）的预后,但目前KRAS突变的NSCLC是否能从ICIs中获益仍不清楚。本研究旨在明确不通KRAS突变亚型与抗PD-1单抗治疗疗效的关系,寻找耐药突变位点并明确耐药机制。方法首先,对接受抗PD-1免疫治疗的NSCLC患者按照不同的KRAS突变类型进行疗效分层分析,然后通过构建小鼠免疫疗效评价模型验证耐药点突变。进一步通过转录组测序和免疫组化分析KRAS突变NSCLC患者的肿瘤微环境的免疫特征,明确耐药点突变与抑制性免疫微环境间的关系。最后,通过体内外实验,探究耐药点突变影响免疫微环境的机制并寻找逆转耐药的潜在治疗策略。结果我们发现并非所有的KRAS突变NSCLC患者都能从抗PD-1免疫治疗中获益,而KRAS-G12D点突变与ICIs耐药显著相关。与Non-G12D突变患者相比,KRAS-G12D点突变患者肿瘤微环境中PD-L1和浸润CD8+T细胞更低。细胞实验和动物实验发现KRAS-G12D点突变可以通过激活P70S6K-PI3K-AKT信号通路下调PD-L1表达,同时通过下调HMGA2表达,降低趋化因子CXCL10/CXCL11的表达和分泌,导致CD8+T细胞浸润的减少。过表达HMGA2可以增加肿瘤细胞CXCL10和CXCL11的分泌,促进CD8+T细胞的浸润。此外,通过构建KRAS-G12D点突变型小鼠肺癌免疫疗效评价模型,以及回顾性分析KRAS-G12D点突变型NSCLC患者的免疫治疗临床数据,发现KRAS-G12D点突变型NSCLC倾向于从抗PD-1免疫治疗联合化疗中获益。结论本研究发现KRAS-G12D点突变是NSCLC抗PD-1免疫治疗的原发耐药因素,并阐明了KRAS-G12D点突变通过塑造抑制性免疫微环境介导免疫治疗抵抗的潜在分子机制。另外,本研究提示免疫治疗联合化疗可能是KRAS-G12D点突变型NSCLC患者的最佳治疗方案。