论文部分内容阅读
目的通过建立发育期铅暴露小鼠模型,以AMPK/mTOR为切入点,研究早期铅暴露对不同生命节点小鼠海马组织中自噬相关因子基因及蛋白水平的影响,同时观察BACE1,p-Tau等神经退行性病变相关分子的表达趋势。方法 4周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为6组,对照组饮用去离子水,实验组以自由饮水方式进行0.2%的醋酸铅溶液染毒3个月后饲养至不同生命节点(4月龄,13月龄和16月龄)。采用qPCR和Western blot检测AMPK、mTOR等相关自噬因子及BACE1的时序性表达。结果随年龄增加,对照小鼠p-AMPK/AMPK蛋白相对比呈现减少趋势,而染铅组呈现平缓减少后持平趋势,各年龄组中p-AMPK/AMPK比值染铅组均低于同龄对照组;16月龄铅暴露小鼠的AMPK mRNA相对表达量在低于同龄对照组;染铅组小鼠p-mTOR/mTOR蛋白相对表达量随增龄呈现减少趋势,其中13月龄及16月龄染铅小鼠p-mTOR/mTOR比值均低于同龄对照组。及Atg12蛋白表达量均随着小鼠增龄而递增,各年龄组中染铅小鼠Beclin-1及Atg12蛋白水平均高于同龄对照组;Beclin-1 mRNA表达仅在13月龄时染铅组比对照组明显增加,而4月龄及13月龄组铅暴露小鼠Atg12 mRNA表达高于同龄对照组;各年龄组中染铅小鼠LC3II/LC3I蛋白相对比均高于对照组;p62蛋白表达量染铅组高于对照组可见于13月龄、16月龄。BACE1蛋白表达量随着年龄增加而呈现增加趋势,各年龄组中染铅小鼠BACE1蛋白及mRNA表达均高于同龄对照组;p-Tau蛋白表达量染铅组随着年龄增加而呈现升高趋势,其中13月龄及16月龄染铅小鼠组p-Tau均高于同龄对照组。结论生命早期铅暴露促进老龄小鼠脑组织自噬体形成因子、抑制自噬降解因子及上调BACE1,p-Tau蛋白表达,提示铅暴露可能促使小鼠脑自噬体成熟而使自噬降解能力减弱引起神经元内自噬体滞留损伤神经功能。