【摘 要】
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本研究建立了敏感、特异、简便的RT-LAMP检测IBV病毒的方法，并且将简并引物引入其中以增强检测的特异性。RT-LAMP还是漏检了病毒分离鉴定为阳性的1份样品，通过测序发现病毒基因组在引物位置没有发生突变，分析可能是由于样品中病毒含量低于检测极限。Pre-N-RTLAMP漏检了3株IBV毒株，出现假阴性，这是很大的缺陷。经过基因序列分析，这3株毒株的核苷酸位点发生了点突变，与引物Blc (BIP
【机 构】
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中山大学生命科学学院,有害生物控制与资源利用国家重点实验室,广东广州 510006 华南农业大学动
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本研究建立了敏感、特异、简便的RT-LAMP检测IBV病毒的方法，并且将简并引物引入其中以增强检测的特异性。RT-LAMP还是漏检了病毒分离鉴定为阳性的1份样品，通过测序发现病毒基因组在引物位置没有发生突变，分析可能是由于样品中病毒含量低于检测极限。Pre-N-RTLAMP漏检了3株IBV毒株，出现假阴性，这是很大的缺陷。经过基因序列分析，这3株毒株的核苷酸位点发生了点突变，与引物Blc (BIP=Blc+B2)错配。总之，本研究建立的RT-LAMP方法，适用于简易实验室和田间检测。
其他文献
目的：通过对real-time PCR反应条件的优化，建立重复性好，特异性、敏感性高的标准品和标准曲线。方法：将重组鸡逗病毒rFPV-F-VP0，分别接种CEF细胞传代20代次，提取1、5、 10、15、20代次重组鸡逗病毒的基因组，同时优化荧光定量PCR反应条件，根据病毒FHN和FVP0核酸序列，设计合成特异性引物，构建制备标准DNA模板。结果：各代次外源基因的拷贝数均不相同，对照FPV没有检测
目的：探讨减毒鼠伤寒沙门氏菌作为活性蛋白基因转移活载体的可行性。方法：将携带真核表达质粒pEGFP-N1-apo-tPA的减毒鼠伤寒沙门氏菌△crp SL1344于含有卡那霉素的培养基中扩大培养，菌体用生理盐水重悬2次以除去菌体毒素，生理盐水定容，平板计数法计数。结果：重组菌注射后的第3天和饮用后第5天，在所检组织中，肝脏、脾脏、肾脏和十二指肠检测到有减毒沙门氏菌存在。注射或饮用后第8～12天，肝
目的：对2006年商品罗曼蛋鸡血管瘤临床病料进行病原分离鉴定，对该分离株进行全基因组序列分析，并利用SPF白来杭蛋鸡构建人工发病模型，研究其致病特点。方法：分别利用DF-1细胞与基于特异性抗ALV-J单抗的免疫荧光法进行病毒分离与ALV-J鉴定。利用各亚群ALV以及禽肿瘤病毒的特异性检测引物对细胞培养物基因组进行检测。将病毒细胞培养液尿囊腔接种11胚龄的SPF白来杭鸡胚，孵化后饲养到22周龄，通过
本研究通过FNC抗DHBV药效学研究，评价其抗DHBV效果，为下一步临床实验提供依据。试验证实，FNC能不同程度抑制鸭体内DHBV的复制，减少血清和肝组织中DHBV-DNA的含量，改善肝脏病理损害程度，有很好的抗DHBV效果，为下一步用于乙肝治疗临床试验提供依据。
目的：通过调查河南省樱桃谷鸭主产区DHBV自然感染情况和分析河南省樱桃谷鸭DHBV基因序列特点，为樱桃谷鸭DHBV感染模型的建立提供依据。方法：在河南省信阳、新郑、焦作三个樱桃谷鸭主产区鸭场采取鸭血，分离血清，提取病毒基因组。根据GenBank收录的DHBV基因组序列设计引物，三地各挑选一株扩增全基因组，克隆到pMD18-T载体中，并对克隆产物进行测序。结果：信阳市樱桃谷鸭感染率为10.5% (1
本研究成功地构建了单核细胞增生性李斯特菌的prfA基因缺失株LM4 ΔprfA和F4636 ΔprfA及其回复突变株，并对缺失株的溶血活性、磷脂酶活性、对细胞的侵袭性以及对小鼠的毒力进行了研究，有力证明了PrfA对LIPI-Ⅰ、LIPI-Ⅱ上相关毒力基因的表达起着调控作用，从而对Lm的致病性起着重要作用，对研究的材料、方法及研究结果进行了综述，同时指出本研究为开展PrfA蛋白的调控机理研究奠定了基
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目的：本研究建立了该病毒的一步法RT-PCR检测方法，可从病料中快速、敏感和特异地检测出DTMUV，为“鸭传染性卵巢炎”的流行病学研究和诊断提供了可靠的方法。方法：通过对鸭坦布苏病毒全序列测定分析，针对NS3基因设计一对引物，进行一步法RT-PCR扩增，扩增大小567bp，并对该方法的条件进行优化，并对106份临床病料进行实际检测。结果：该一步法RT-PCR检测方法能从阳性细胞毒和临床上患有DTM
本试验为了提高鸭疫里氏杆菌基因工程疫苗免疫效果，将RA OmpA基因与从健康鸭外周血淋巴细胞总RNA中扩增出的DuIL-2基因，两段基因以一段柔性linker相连，利用SOE-PCR技术，构建OmpA-DuIL-2融合基因，并进行了原核表达。经Western-Blot分析结果表明，OmpA基因和鸭IL-2基因融合基因表达的产物具有较好的外膜蛋白抗原性和鸭IL-2免疫原性，为进一步开发和研制新型RA
本试验以法倍灵疫苗为对照组，评价新型疫苗威立克(HVT+IBD二联疫苗)对黄羽肉鸡传染性囊病的免疫保护效果。综合实验室和现场免疫试验结果，法倍灵免疫对黄羽肉鸡法氏囊发育造成一定程度的损伤，而威立克免疫则不会造成损伤；威立克组在21d时IBD抗体水平高于法倍灵组；同时，威立克组优于法倍灵组，特别在21-28d尤其如此。实验结果表明，威立克免疫能为黄羽肉鸡提供更好的免疫保护，并能得到更好的经济效益。