温阳解表与温中散寒中药麻黄和天仙子抗肿瘤作用机理研究

来源 :2013年全国中医肿瘤学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hestry
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目的:探索温阳阳解表与温中散寒中药麻黄和天仙子的主要成分麻黄碱和山莨菪碱对人乳腺癌SKBR3细胞增殖、周期及凋亡的影响.方法:体外培养的人乳腺癌SKBR3细胞为研究对象.选择处于对数生长期的细胞,每种药物各自分为7个实验处理组:空白对照组,麻黄碱低剂量组(1ug/ml)、中剂量组(10ug/ml)、高剂量组(100ug/ml),肾上腺素低(0.05ug/ml)、中(0.5ug/ml)、高(5ug/ml)剂量组;空白对照组,山莨菪碱低(0.2ug/ml)、中(2ug/ml)、高(20ug/ml)剂量组,阿托品低(0.015ug/ml)、中(0.15ug/ml)、高(1.5ug/ml)剂量组.台盼蓝细胞计数法法分别检测麻黄碱和山莨菪碱在不同时间对SKBR3细胞的增殖抑制作用,并绘制细胞存活曲线.流式细胞仪(FCM)检测各组的细胞周期分布和凋亡指数变化,ELISA检测各组的CAMP与CD1水平,Western blotting检测各组的PKA磷酸化水平.结果:台盼蓝计数法检测麻黄碱和山莨菪碱对SKBR3生长曲线的影响:麻黄碱和山莨菪碱对SKBR3细胞均具有增殖抑制作用,呈时间及剂量依赖性.麻黄碱和山莨菪碱各剂量组与空白组比较,随着药物剂量的加大,各组的G0/G1期细胞逐渐增多,而S和G2/M期细胞则逐渐减少,增殖指数PI值亦逐渐减少.其中高剂量组各项指标与空白组比较均有统计学意义(P<0.01).SKBR3细胞经不同麻黄碱剂量组处理48h后,流式细胞仪测得细胞凋亡率随麻黄碱剂量的增大而逐渐升高.其中麻黄碱中,高剂量组与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01).而山莨菪碱不同剂量组则未显示出诱导凋亡的作用(P>0.05).麻黄碱(100 μg/ml)与山莨菪碱(20μg/ml)在短时间内(30分钟)增加SKBR3细胞内CAMP增加与CD1水平,在48小时对SKBR3细胞PKA磷酸化没有影响.结论:麻黄碱和山莨菪碱对SKBR3细胞均具有抑制增殖的作用,并呈剂量和时间依赖性.麻黄碱和山莨菪碱均能将SKBR3细胞阻滞于G0/G1期.麻黄碱尚具有较弱的诱导肿瘤细胞凋亡的作用.
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