【摘 要】
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目的:本实验通过研究香烟烟雾暴露致大鼠COPD动物模型肺组织中气道区和肺泡区uPA/uPAR/PAI-1表达的异同,及其与病理变化的关系,并进一步观察香烟提取物(CSE)刺激对人肺泡上皮细胞A549和支气管上皮细胞SEAS-2B表达uPA/uPAR/PAI-1影响,证实uPA系统成分在COPD肺泡上皮和气道上皮表达存在差异的推测,进一步探讨uPA系统在COPD发病中的作用。方法:(1) 20只雄性
【出 处】
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2011中华医学会呼吸病学年会暨第十二次全国呼吸病学学术会议
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目的:本实验通过研究香烟烟雾暴露致大鼠COPD动物模型肺组织中气道区和肺泡区uPA/uPAR/PAI-1表达的异同,及其与病理变化的关系,并进一步观察香烟提取物(CSE)刺激对人肺泡上皮细胞A549和支气管上皮细胞SEAS-2B表达uPA/uPAR/PAI-1影响,证实uPA系统成分在COPD肺泡上皮和气道上皮表达存在差异的推测,进一步探讨uPA系统在COPD发病中的作用。方法:(1) 20只雄性Wistar大鼠随机分为COPD模型组和对照组,COPD组持续烟熏三月建立动物模型,HE病理切片测量肺平均内衬间隔(MLI)和平均肺泡数(MAN)评价肺泡区肺气肿的程度,天狼星红染色评价气道区小气道纤维化的程度,免疫组化染色检测两组大鼠uPA/uPAR/PAI在小气道和肺泡区内的表达情况;(2)使用CSE分别刺激培养的A549细胞和BEAS-2B细胞,使用RT-PCR法、Westernblot分别检测细胞uPA/uPAR/PAI-1mRNA和蛋白表达水平的变化,Elisa法则检测细胞培养上清中uPA/uPAR/PAI-1表达水平的变化。结果:(I)烟熏三月后大鼠气道内出现慢性支气管炎的病理表现,肺组织也呈现出肺气肿的病理表现.形态学定量分析示:COPD模型组与健康对照组比较,肺平均内衬间隔(MLI)增大(P<0. 05 );平均肺泡数(MAN)减少(P<0. 05;天狼星红染色示COPD组较健康对照组小气道壁周围胶原纤维的含量明显增加;免疫组化显示COPD组较健康对照组uPA/uPAR/PAI-1肺组织表达均明显增加,但肺泡区uPA表达占优势状态而气道区PAI-1占优势状态。(2) CSE刺激后,uPA/uPAR/PAI-1在肺泡_L皮细胞A549和支气管_L皮细胞BEAS-2B的mRNA和蛋白的表达均有所增加,但A549中uPA增加更显著而BEAS-2B中PA工砚增加更显著,Elisa检测上清液也得到了相似的结果。结论:香烟刺激可以调节肺泡上皮和支气管上皮uPA系统表达变化,但两种细胞之间存在差异,肺泡上皮细胞uPA和uPAR水平上调更为明显,呈现uPA优势状态,有利于蛋白水解。而支气管上皮细胞则呈现PAI-1优势状态,有利于纤维化形成。两种细胞对于uPA系统表达状态不同可能部分解释COPD患者肺气肿和小气道纤维化这两种不同病理变化的原因。
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