IBV DNA疫苗-脂质体复合物在鸡体内的分布及安全性研究

来源 :中国畜牧兽医学会禽病分会第十三次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jincaijuan
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为研究本实验室构建并制备的DNA疫苗-脂质体复合物在鸡体内的组织分布和安全性,经腿部肌肉分点注射及滴鼻、点眼两种免疫途径接种7日龄的非免疫健康雏鸡,利用PCR方法对疫苗在鸡体内的分布及整合进行检测研究.并通过肌肉注射和滴鼻、点眼两种途径免疫接种1日龄雏鸡;相同剂量连续免疫接种7日龄雏鸡以及5倍常规使用剂量(超大剂量)免疫接种相同日龄雏鸡,来进行免疫毒性实验研究.实验期间对实验鸡进行一般临床表现观察,并分别在免疫后48h和30日龄进行血液学、血液生化学、病理及病理组织学检测.实验结果表明:DNA疫苗-脂质体复合物均能在免疫接种后迅速分布于血液及所有检测的组织器官,脂质体对DNA疫苗的分布起到正协同作用,未检测到IBV DNA疫苗-脂质体复合物与鸡细胞染色体发生整合的现象.试验鸡无异常临床反应,无死亡.未见疫苗免疫引起的毒性反应,疫苗具有良好的安全性
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根据GenBank中瘦蛋白(leptin)的基因序列设计合成了引物和探针,对荧光定量PCR的方法进行了方法学的评估,建立了TaqmanMGB荧光定量RT-PCR检测方法.结果表明:所构建的PMD-18Tleptin基因荧光定量PCR检测标准品应用Taqman荧光探针技术建立的标准曲线线性关系好(R2=0.996),灵敏度和特异性高(可检测出低于10个拷贝数/μL的样品),准确可靠.此方法可作为荧光
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