【摘 要】
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采用核糖核酸实时荧光定量PCR(RNA-qPCR)和染色质免疫共沉淀方法(ChIP)方法,在转录水平和翻译后共价修饰水平探测斑马鱼成纤维细胞(ZF4)的水通道蛋白1a(AQP1a)基因受到低温处理后的表达的变化和启动子区域组蛋白修饰变化.提取常温培养(28℃)的ZF4 细胞(对照组)和低温(18℃)处理5 天、30 天的斑马鱼细胞(ZF4 细胞(实验组)18℃5ds)和常温培养的斑马鱼成纤维细胞(
【机 构】
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省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室,上海海洋大学,水产与生命技术学院,上海 201306
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采用核糖核酸实时荧光定量PCR(RNA-qPCR)和染色质免疫共沉淀方法(ChIP)方法,在转录水平和翻译后共价修饰水平探测斑马鱼成纤维细胞(ZF4)的水通道蛋白1a(AQP1a)基因受到低温处理后的表达的变化和启动子区域组蛋白修饰变化.提取常温培养(28℃)的ZF4 细胞(对照组)和低温(18℃)处理5 天、30 天的斑马鱼细胞(ZF4 细胞(实验组)18℃5ds)和常温培养的斑马鱼成纤维细胞(ZF4 WT)总RNA,反转录后进行qPCR；收集相同处理条件的3x107ZF4,和用1％甲醛交联固定,每个IP 用1x107 细胞,分别用H3K4me3,H3K27me3,IgG 抗体进行染色体免疫共沉淀实验,分离纯化的ChIP DNA,进行qPCR.
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