【摘 要】
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目的：探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)体内外分化为心肌样细胞过程中心肌特异性结构蛋白的发育对于细胞定向分化的意义。方法：体外:5-氮杂胞苷(5-aza)诱导大鼠MSCs后，检测不同时间段心肌特异结构蛋白：肌联蛋白(titin)，肌球蛋白(MHC)，肌动蛋白(actin)及肌钙蛋白T(cTnT)的表达；采用RNAi技术干扰诱导过程中titin的表达，观察MSCs的分化情况。体内：经5-aza诱导的M
【机 构】
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重庆医科大学附属儿童医院心血管内科 儿科研究所
【出 处】
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中华医学会第五次全国儿科中青年学术交流大会
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目的：探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)体内外分化为心肌样细胞过程中心肌特异性结构蛋白的发育对于细胞定向分化的意义。
方法：体外:5-氮杂胞苷(5-aza)诱导大鼠MSCs后，检测不同时间段心肌特异结构蛋白：肌联蛋白(titin)，肌球蛋白(MHC)，肌动蛋白(actin)及肌钙蛋白T(cTnT)的表达；采用RNAi技术干扰诱导过程中titin的表达，观察MSCs的分化情况。体内：经5-aza诱导的MSCs及干扰titin表达后的MSCs分别移植入大鼠心肌组织后，于0h、1d、3d、7d、2w、4w检测上述结构蛋白的表达。
结果：5-aza诱导后，MSCs的titin、MHC、actin、cTnT。表达上调；针对titinN2B区构建的重组质粒pGenesil-titin转染5-aza诱导两周的MSCs，titin、cTnT表达降低，MHC及actin未受明显影响；转染pGenesil-titin(实验组)和转染HK(对照组)的MSCs移植到正常心肌组织后，即刻检测到有少量心肌细胞特异性蛋白actin、MHC、cTnT、titin的表达，移植后一周，实验组蛋白表达量均较低，至四周时仍然维持在低水平，其中以titin的表达最低；对照组蛋白表达量均逐渐增加，于一周时达到最高峰，此后增速减缓，至四周时，蛋白表达量仍比宿主心肌细胞低。
结论：MSCs在体内外可分化成心肌样细胞，但分化程度不高，尚不具备完整的收缩结构基础；结构蛋白特别是titin的发育在MSCs心肌样分化过程中具有重要意义。
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