论文部分内容阅读
目的：构建pcDNA3.1/myc-His-DJ-1和pcDNA3.1/myc-His-DJ-1M261重组表达载体,为研究DJ-1M26I突变与细胞增殖、凋亡的关系及建立转基因动物模型奠定基础。方法：采用突变试剂盒将DJ-1蛋白第26位氨基酸进行突变。分别构建pcDNA3．1/myc-His-DJ-1和pcDNA3．1/myc-His-DJ-1M261重组表达栽体,并采用脂质体介导的方法分别将其转染入N]H3T3细胞,500μg/ml G418压力筛选稳定克隆,对2种转染细胞在DNA水平、RNA水平和蛋白质水平进行鉴定,采用MTT染色方法和AnnexinV-FITC试剂盒进行转染阳性克隆细胞的细胞活力与细胞凋亡检测。结果：peDNA3．1/myc-His-DJ-1和pcDNA3．1/myc．His-DJ-1M26I重组质粒转染NIH3T3细胞经G418筛选后,PCR方法检测分别获得1个和3个阳性细胞克隆,RT-PCR及western blot方法进行DJ-1-His基因表达检测,结果均证明外源插入基因的表达,MTT实验结果初步证明转染DJ．1嘲基因的NIH3T3阳性细胞组细胞增殖速率低于正常NIH3T3细胞组(p<0．05),转染DJ-1基因的NIH3T3阳性细胞细胞增殖速率与正常NIH3T3细胞相比无明显差别：细胞凋亡检测表ql转染DJ．1ma基因的NIH3T3阳性细胞细胞凋亡率高于正常NIH3T3细胞,转染DJ一1基因的NIH3T3阳性细胞细胞凋亡率低于正常NIH3T3细胞(p
其他文献
目的：研究KM母鼠带仔数对于仔鼠生长的影响，为KM小鼠生产中的福利评估指标提供科学依据。方法：在SPF级屏障设施饲养环境下，对KM小鼠每胎带仔鼠分别为10只、13只和16时仔鼠初
目的:分析碱性清洗剂对消毒供应室护理清洗质量的影响.方法:选取2018年1月至2019年12月间560件经消毒供应室清洗的医疗器械进行研究,运用随机数字表法分为实验组与对照组各28
分析引起ICU患者发生肠内营养相关性腹泻的原因,以减少腹泻的发生.搜集近年来国内外的医学文献,并加以分析、整理.从而为患者提供更好的营养支持.
目的:研究宫颈癌患者在放疗治疗过程中出现放射性直肠炎及膀胱炎的情况,为以后的防治研究提供依据.方法:选取本医院在2018年5月到2019年5月期间肿瘤科诊治的92例宫颈癌患者,
目的：本课题采用立体定向方法,根据血液中主要成分凝血酶,谷氨酸,血红蛋白,及纤溶酶的浓度向大鼠基底节区注入,建立试验性大鼠模型,并与生理盐水组对照,应用免疫组化技术
会议
目的:研究舒适护理在腹腔镜小儿疝气护理中的实际应用效果.方法:于我院2019年1月份到2019年12月份入院的小儿疝气患儿中选取80例,将其随机分为对照组与观察组,针对对照组患儿
目前我国存在着水资源短缺，水的供需矛盾日益突出的问题，因此在农田灌溉中如何能提高水资源的利用率，实施节水灌溉成了普遍关注的重点，我们需要在以往的实践中不断地总结经验和不
目的:研究早期急救护理在重型颅脑损伤合并脑疝的实施效果.方法:研究时间2019年1-12月,收治的重型颅脑损伤合并脑疝的患者68例为研究对象,按照数字随机法分成两组;对照组开展
目的：研究信号通路β-连环蛋白在人结肠癌cc1227细胞及其肿瘤球细胞中的表达。方法：培养cc1227细胞及其肿瘤球,分别提取cc1227细胞和肿瘤球细胞的总RNA,设计引物,使用RT-PC