【摘 要】
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对羟基苯乙酸是重要的医药、农药和精细化工中间体,具有庞大的市场需求和前景.通过在大肠杆菌中引入外源基因Ipdc,tydc和aro10,与大肠杆菌的苯乙醛脱氢酶编码基因FeaB构
【机 构】
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中山大学,微生物与合成生物学研究中心,广东广州510275
【出 处】
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中国微生物学会第十六届全国微生物学教学和科研及成果产业化研讨会
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对羟基苯乙酸是重要的医药、农药和精细化工中间体,具有庞大的市场需求和前景.通过在大肠杆菌中引入外源基因Ipdc,tydc和aro10,与大肠杆菌的苯乙醛脱氢酶编码基因FeaB构成三个不同的合成对羟基苯乙酸的合成途径Ipdc-FeaB,tydc-TynA-FeaB和aro10-FeaB,通过表达载体pBbB2K对三条合成途径进行表达,其对羟基苯乙酸产量分别为1410.7±64.6 mg/L,1551.779±7.28 mg/L,1831.5±34.9 mg/L.后期,我们将通过易错PCR和DNA Shuffling对最优合成途径aro10-FeaB进行定向进化,提高酶催化活性;通过TIGR法协调平衡表达aro10和FeaB,从而提高对羟基苯乙酸的产量.通过CRMAGE技术对基因组进行编辑,增强合成途径与基因组的适配性,进一步提升对羟基苯乙酸的产量.
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