【摘 要】
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目的 探讨Sirtuin3(SIRT3)对缺氧(OGD)的影响及可能发挥作用的机制.方法 1)将PC12细胞分为空白对照组、添加重组SIRT3蛋白组、添加重组SIRT3蛋白+缺氧组、单纯缺氧组.通过乳酸脱氢酶释放实验测定各组细胞活性.Western Blot法测定各组细胞内过氧化物酶体增生激活受体的共刺激因子-1α(PGC-1α)及锰超氧化物歧化酶(MnSOD)的蛋白表达水平.2)进一步利用PC1
【机 构】
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中山大学附属第一医院神经内科,广东 广州 510080 江门市中心医院,广东 江门 529030
【出 处】
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广东省医学会第十五次神经病学学术会议暨第五届粤港澳神经病学学术会议
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目的 探讨Sirtuin3(SIRT3)对缺氧(OGD)的影响及可能发挥作用的机制.方法 1)将PC12细胞分为空白对照组、添加重组SIRT3蛋白组、添加重组SIRT3蛋白+缺氧组、单纯缺氧组.通过乳酸脱氢酶释放实验测定各组细胞活性.Western Blot法测定各组细胞内过氧化物酶体增生激活受体的共刺激因子-1α(PGC-1α)及锰超氧化物歧化酶(MnSOD)的蛋白表达水平.2)进一步利用PC12细胞成功构建空白载体(empty vector)及SIRT3-/-稳定细胞株，将两种细胞分别分为对照组(control)；缺氧组(OGD).MTT、乳酸脱氢酶释放实验测定各组细胞活性.ATP荧光检测试剂盒测定胞内的ATP水平.Western Blot法测定各组细胞内过氧化物酶体增生激活受体的共刺激因子-1α(PGC-1α)及锰超氧化物歧化酶(MnSOD)的蛋白表达水平.实时荧光定量PCR测各组细胞内PGC-1α基因的相对水平.3)将SIRT3-/-细胞株分为对照组、添加重组SIRT3蛋白组、添加重组SIRT3蛋白+缺氧组、单纯缺氧组.通过乳酸脱氢酶释放实验测定各组细胞活性.Western Blot法测定各组细胞内过氧化物酶体增生激活受体的共刺激因子-1α(PGC—1α)及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)的水平.
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