锶磷硅生物陶瓷对人牙髓干细胞增殖和成牙本质、成血管分化的影响

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目的 1.以传统支架材料β-磷酸三钙(β-TCP)作为对照,在不添加额外的成牙本质或成血管试剂的条件下,探索锶磷硅复合生物陶瓷材料(SPS)对人牙髓干细胞(h DPSCs)增殖活性的影响,筛选出合适的浸提液浓度。2.进一步研究SPS对h DPSCs成牙本质、成血管性能的促进作用,为牙再生领域寻求有潜力的新型支架材料。方法 1.通过改良组织块法获取人牙髓干细胞原代细胞。2.人牙髓干细胞的传代培养和扩增。3.SPS及β-TCP浸提液的制备。4.MTT法检测SPS及β-TCP浸提液对h DPSCs增殖作用,进而筛选出适宜浓度。5.通过碱性磷酸酶(ALP)活力的测定检测SPS及β-TCP浸提液对h DPSCsc成牙本质及成血管分化的作用。6.通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Real Time-PCR)检测SPS及β-TCP浸提液对h DPSCs成牙本质及成血管相关基因的表达水平的影响。结果 1.采取组织块法分离培养人牙髓细胞,传代培养至3-5代,能够得到纯度较高的人牙髓干细胞。2.SPS生物陶瓷浸提液可促进人牙髓干细胞增殖,25mg/ml、12.5mg/ml、6.25 mg/ml浓度的SPS浸提液培养h DPSCs 7d时增殖显著。3.SPS生物陶瓷浸提液可促进人牙髓干细胞早期成牙本质、成血管化。12.5mg/ml SPS生物陶瓷浸提液培养h DPSCs,其ALP定量检测及定性染色在培养10天后开始增高,成牙本质和成血管基因的m RNA表达在早期增高,不呈时间依赖性。结论12.5mg/ml SPS生物陶瓷浸提液能够明显促进h DPSCs的增殖,提高成牙本质和成血管相关基因的表达,进而促进h DPSCs向成牙本质细胞和血管方向分化。
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