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研究目的:探讨氧化应激致损条件下,受损骨细胞(受损后及受损后恢复期骨细胞)及受其影响的周围骨细胞促破骨分化功能的变化。研究方法:体外培养MLO-Y4细胞系,过氧化氢(H2O2)模拟氧化应激环境,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测骨细胞凋亡比例,CCK-8检测骨细胞存活比例,筛选合适浓度的H2O2做为致损条件,检测受损后骨细胞及撤除致损条件的恢复期骨细胞Rankl、OPG、M-CSF基因及蛋白表达情况。并收取受损后及恢复期骨细胞培养液配制条件培养基处理正常骨细胞,观察受损骨细胞对正常骨细胞促破骨相关功能的影响。此外,将受损骨细胞、条件培养基培养的骨细胞分别与破骨前体细胞系RAW264.7共培养,TRAP染色观察破骨细胞分化状况。研究结果:受损后骨细胞M-CSF的表达明显增加,Rankl的表达轻度增加,Rankl/OPG无明显变化;受损后恢复期骨细胞M-CSF和Rankl的表达最终表现为梯度降低,Rankl/OPG梯度下降。条件培养基处理的骨细胞Rankl、M-CSF表达增加,Rankl/OPG增大;共培养条件下,受损骨细胞组破骨分化未见增多,受条件培养基影响的骨细胞组,前体细胞出现明显破骨分化趋势。研究结论:受损骨细胞通过Rankl调控破骨细胞分化的功能下降,周围存活骨细胞受到受损骨细胞的影响,Rankl表达上调,在破骨前体细胞分化的进程中发挥主要作用。这种调控作用的具体机制有待进一步研究。