【摘 要】
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目的 microRNA (miRNA)是一类具有靶向沉默靶标mRNA的小分子RNA,研究发现:在动脉粥样硬化(AS)发展过程中miRNA表达发生改变,其中包括miR-216.胱硫醚-y裂解酶(cystathionine-
【机 构】
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南华大学心血管病研究所,南华大学生命科学研究中心,湖南省动脉硬化学重点实验室
【出 处】
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湖南省生理科学会2015年度学术年会暨第十届理事会换届选举大会
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目的 microRNA (miRNA)是一类具有靶向沉默靶标mRNA的小分子RNA,研究发现:在动脉粥样硬化(AS)发展过程中miRNA表达发生改变,其中包括miR-216.胱硫醚-y裂解酶(cystathionine-γ-lyase,CSE)是心血管系统中催化内源性硫化氢(H2S)产生的关键酶.近年来的研究发现,H2S能降低动脉粥样硬化病变的发展,发挥抗AS的作用,但具体机制尚未阐明.本研究通过观察miR-216对CSE活性、内源性H2S表达的影响,研究H2S对于ABCA1介导的胆固醇流出的影响及miR-216在其中的作用.方法 培养的THP-1和RAW264.7细胞用PMA和氧化低密度脂蛋白(oxLDL)预处理,诱导细胞分化成泡沫细胞,再用荧光素酶报告基因、miR-216 mimics/inhibitor、CSE过表达载体以及油红0处理细胞.采用荧光素酶检测试剂盒检测miR-216与CSE3UTR靶向结合情况qRT-PCR及Western blot分别检测CSE和ABCA1的表达;通过分光光度计检测内源性H2S水平;油红0检测细胞内胆固醇含量,采用液体闪烁技数仪检测细胞胆固醇流出情况.
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