赭曲霉聚酮合酶基因在OTA合成中的功能分析

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赭曲霉毒素A(OTA)具强肾毒性,亦可引起机体肝毒性、致畸和免疫抑制,WHO将其列为2B类致癌物。OTA主要由曲霉属和青霉属真菌产生,污染谷物、咖啡、葡萄、酒等,其中赭曲霉是谷物污染最主要的产毒菌之一,聚酮合酶(PKS)是OTA生物合成的启动酶。赭曲霉fc-1基因组经测序分析,其基因组大小约为38.75Mb,组装后得到28个scaffolds。赭曲霉基因组通过与炭黑曲霉ITEM 5010和黑曲霉CBS 513.88基因组比较分析,预测出可能参与OTA生物合成的pks基因(AoOTApks-1和-2)。AoOTApks-1基因位于OTA合成基因簇上,其编码蛋白为高度还原性PKS,与炭黑曲霉ITEM 5010中OTA合成基因AcOTApks同源。赭曲霉培养3天至6天,OTA产量由21.30μg/g剧增至317.58μg/g,此后OTA产量保持稳定,AoOTApks基因表达量与OTA产量趋势吻合。AoOTApks基因敲除显示,ΔAoOTApks-1和-2 OTA产量较野生型分别下降100.0%和53.8%。结果表明AoOTApks-1可能直接参与OTA生物合成,而AoOTApks-2间接参与OTA的合成。
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