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取接种羊红细胞一周后杀死的小鼠血清，用低离子强度的磷酸盐缓冲液透析，沉淀物作为粗制的ＩｇＧ球蛋白，用ｔｒｉｓ－ＨＣＬ缓冲液溶解，透析平衡，过SehadexG200凝胶柱二次，收集第一峰，蛋白定量，初步鉴定证实为ＩｇＭ。分装低温保存作为免疫原。选择一岁以内雄性健康绵羊，用微量法免疫，三次接种共用抗原７ｍｇ，分离血清用琼脂双扩散法测定效价为1∶128。抗血清经硫酸铵盐析法提取球蛋白与异硫氰酸荧光素结合，制备成初级羊抗鼠ＩｇＭ荧光抗体，用于单克隆抗体的大量初筛工作。将初级荧光抗体通过鼠ＩｇＧ球蛋白交联的亲和层析柱，吸附与鼠ＩｇＭ有交叉的抗体部分，获得纯化的羊抗鼠ＩｇＭ荧光抗体。此结合物经免疫荧光染色检查证明不与鼠ＩｇＧ交叉，可与纯鼠ＩｇＭ和免疫鼠腹水中的ＩｇＭ产生良好反应。