【摘 要】
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在六孔板上培养HepG2细胞,用HBV阳性血清体外感染培养的HepG2细胞,然后分成感染组和对照组。 实验组采用HBV阳性血清和细胞共孵育24 h,而后用PBS彻底清洗细胞,收集PBS最后
【机 构】
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第四军医大学流行病学教研室,西安 710032
【出 处】
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中国科协第五届青年学术年会——陕西卫星会议
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在六孔板上培养HepG2细胞,用HBV阳性血清体外感染培养的HepG2细胞,然后分成感染组和对照组。
实验组采用HBV阳性血清和细胞共孵育24 h,而后用PBS彻底清洗细胞,收集PBS最后一次洗液和PBS洗后每隔12h的细胞上清液.在收集完最后一次细胞上清液后,再收集细胞爬片和残留在细胞培养板中的细胞.通过ELSIA检测细胞培养上清中HBsAg；PCR方法检测细胞培养上清和细胞中HBV DNA；细胞免疫荧光检测的方法检测细胞中的HBSAg；免疫荧光定量PCR检测细胞培养上清中HBVDNA的含量.结果表明HBV感染组HepG2细胞培养上清中从PBS洗后第12 h即可检测到HBsAg阳性并持续到84h,PCR检测感染组细胞培养上清和细胞中HBVDNA阳性,对照组细胞培养上清和细胞中PCR检洲HBV DNA阴性.细胞免疫化学检测到感染组细胞中HBsAg阳性.荧光定量PCR检测感染组细胞培养上清的HBVD NA的量为荧光定量PCR检测,感染组洗后的HBV定量为阴性,而在PBS洗后36 h、84 h细胞培养上清中HBV的量达到5×105,3×106(copy/mL).这表明采用HBV阳性血清体外毒染HepG2细胞的实验模型是可行的.
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