目的研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H pylori)简易分离培养及保存方法,构建H pylori小型菌库。方法首先采用H pylori选择培养基,以烛缸法分离培养不同来源的标本,然后以革兰染色显微镜形态检查及生化试验鉴定为H pylori,最后把签定为H pylori的纯培养物,分别置于布氏肉汤、50%甘油血清肉汤、50%甘油蛋清三种不同的保存液,-20℃保存,并在保存后1、6、12d分别检测其存活率。结果培养58份临床胃镜活检标本,获13株H pylori;56名在校大学生口腔和粪便标本,获9株H pylori;共获21株H pylori,经布氏肉汤、50%甘油血清肉汤、50%甘油蛋清三种保存液-20℃保存,21株H pylori存活率在1和6d时,三者均大于90%,统计学无显著差异;12d时,50%甘油血清存活率大于80%,布氏肉汤和50%甘油蛋清均低于50%,差异有统计学意义。结论采用烛缸法可以成功分离培养H pylori,以50%甘油血清肉汤-20℃可以保存H pylori活性12天以上,两者结合可以在一般实验室构建简易的过渡性H pylori小型菌库,方便H pylori菌种的使用。