目的：研究单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)潜伏相关转录体(LAT)开放读码框3(ORF3)在体外培养的非洲绿猴肾细胞(Vero)中的表达特点,及其对细胞活性的影响。方法：双酶切和测序检验本实验室构建好的带绿色荧光蛋白(GFP) 标签的HSV-2 LAT ORF3真核表达载体pEGFP-C2/LAT-ORF3的可用性,并将其转染入vero细胞,通过观察荧光和RT-PCR检验其在细胞中表达,荧光显微镜观测细胞中荧光的分布和MTT法进行细胞活性分析。结果：融合蛋白在细胞核中大量集中,且影响了绿色荧光蛋白在细胞中的分布；重组质粒对Vero细胞没有损伤作用。本实验的结果显示,转染重组质粒96h后,ORF3在Vero细胞中仍然大量表达,这说明瞬时转染后有足够的时间来研究ORF3在细胞中的作用。转染了重组质粒的Vero细胞中,荧光主要集中在细胞核中,在细胞质中分布较少,荧光形状为圆形或椭圆形,与转染空白载体的Vero细胞中的荧光在细胞质和细胞核中均匀分布且不规则形不同。说明转染了重组质粒的Vero细胞细胞核中有大量融合蛋白表达。这与Lock等研究HSV-1LAT表达的蛋白时得出的结果相似[5]。本实验在用MTT检测转染不同质粒后检测细胞活性,发现转染Xfect对Vero细胞伤害很小,转染空白载体对细胞有显著的伤害作用,而转染重组质粒可以消除这种伤害作用,可能是ORF3促进了细胞的生长,而将空白载体对细胞的损害抵消。结论：HSV-2 LAT ORF3可抵消空白载体对细胞的损伤作用；其作用靶点可能主要存在于细胞核中,为阐明HSV-2 LAT ORF3在潜伏复发中的功能提供了实验基础。