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目的:探讨VEGF特异siRNA对未成熟胎儿视网膜微血管内皮细胞RECs增殖中的作用。
方法:原代培养未成熟胎儿的视网膜微血管内皮细胞,用氯化钴模拟缺氧生长状态,设计、合成VEGF特异siSNA并用脂质体转染。将细胞分为VEGF siSNA转染组(实验组)、GAPDH siRNA转染组(阳性对照组)和negative siRNA转染组(空白对照组),RT-PCR和Western blot分别从mRNA和蛋白水平检测转染后RECs VEGF的表达情况,MTT比色法和光镜计数描绘细胞生长曲线,观察细胞的生长增殖情况。
结果:转染VEGF siRNA脂质体复合物后的细胞VEGF mRNA和蛋白表达均较对照组明显下降,转染后12、24、48、72小时RECs的增殖抑制率分别为15.0%,42.9%,78.3%和65.9%。
结论:VEGF特异siSNA能下调未成熟胎儿视网膜微血管内皮细胞的相关基因的表达,抑制细胞增殖,为临床基因治疗早产儿视网膜病提供了新思路。