论文部分内容阅读
目的 通过观察α7nAchR激动剂(PHA568487)在胆碱能抗炎通路(Cholinergic Anti-inflammatory Pathway,CAP)中对体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)致大鼠肠屏障损伤的影响,探讨其肠屏障的保护作用及可能机制.方法 清洁级成年雄性SD大鼠96只,体重400~500g,随机分为4组(n=24):假手术组(S组)、体外循环组(C组)、α7nAChR激动剂(PHA568487)+CPB组(CP组)、α7nAChR激动剂(PHA568487)+特异性α7nAhR阻断剂(Methyllycaconitine,MLA)+CPB组(CPM组).根据采血时间点每组再随机分成4个亚(n=6).采用右颈静脉腔房引流,左股动脉灌注建立大鼠体外循环模型.S组不建模型,穿刺后进行机械通气60min,其余三组进行CPB60min.分别为CPB前(T0),停CPB即刻(T1),停CPB后2h(T2),停CPB后6h(T3),将大鼠脊椎脱臼法处死,取颈静脉血和肠组织样本.采用ELISA法测定血清二胺氧化酶(DAO)、肿瘤坏死因子(TNF-α)水平的变化;采用Western-blot法检测肠上皮闭锁蛋白(Occludin)和斑块蛋白(ZO-1)的表达;取器官组织匀浆及腔静脉血进行细菌培植,计算细菌移位率.结果 与S组相比,C组、CP组和CPM组在T1~T3时点的TNF-a、DAO水平及细菌移位率明显升高(p<0.05),Occludin蛋白、ZO-1蛋白表达明显降低(p<0.05);与C组相比,CP组与CPM组在T1~T3时点的TNF-a、DAO水平及细菌移位率明显降低(p<0.05),Occludin蛋白、ZO-1蛋白表达明显增加(p<0.05);CPM组在T1~T3时点和CP组相比,TNF-a、DAO水平及细菌移位率明显升高(p<0.05),Occludin蛋白、ZO-1蛋白表达明显降低(p<0.05).结论 α7nAchR激动剂在一定程度上减轻CPB导致的大鼠肠黏膜屏障损伤并减少远隔器官细菌移位率,其机制可能与激活CAP途径来抑制炎症反应及上调肠上皮紧密连接蛋白表达有关.