【摘 要】
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目的 设计特异序列,应用siRNA沉默肝癌衍生生长因子(HDGF),检测A549、H226等NSCLC细胞在生长、侵袭迁移等肿瘤分子生物学特性上的变化,检测HDGF及下游调节基因在RNA、蛋
【机 构】
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中国医科大学肺癌中心,沈阳110001
【出 处】
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肿瘤多学科综合诊治新进展学术研讨会
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目的 设计特异序列,应用siRNA沉默肝癌衍生生长因子(HDGF),检测A549、H226等NSCLC细胞在生长、侵袭迁移等肿瘤分子生物学特性上的变化,检测HDGF及下游调节基因在RNA、蛋白质等表达水平上的变化,揭示HDGF促进NSCLC细胞侵袭生长分子机制.检测HDGF等在手术切除NSCLC组织中的蛋白表达水平,判定其在NSCLC术后分子分期、预后预测、指导是否选择术后化放疗中的临床意义.方法 应用siRNA沉默、cDNA基因芯片、细胞培养、转染、Northern blot、Western blot,及细胞增殖、集落形成、侵袭迁移、裸鼠皮下移植瘤侵袭生长等系列体外、体内肿瘤分子生物学检测技术,揭示HDGF在促进NSCLC侵袭生长中的分子机制.应用免疫组化技术,检测158例手术切除NSCLC组织中HDGF等蛋白表达情况,进行生存分析、预后判定.结果 siRNA技术能够特异靶向沉默HDGF,显著降低NSCLC细胞集落形成、侵袭、迁移能力以及裸鼠皮下移植瘤侵袭生长能力等,揭示了HDGF在促进NSCLC侵袭生长中的重要作用.应用基因芯片等技术,揭示siRNA沉默HDGF,可显著下调ADAM9等系列下游基因,从而抑制NSCLC细胞侵袭迁移能力,提示HDGF通过调节ADAM9等参与的信号转导途径,发挥其分子生物学作用.HDGF蛋白在手术切除NSCLC中显著高表达.HDGF高表达组(78例,占49.4％)的5年生存率为38.2％,显著低于HDGF低表达组(80例,占50.6％)的5年生存率63.1％(P=0.009).直线相关分析表明HDGF表达水平与术后生存时间呈负相关.多因素生存分析表明术后病理分期和HDGF表达水平是手术切除NSCLC预后判定的独立因素.HDGF等高表达者施行化放疗,可能获得更好的疗效.结论 siRNA靶向沉默HDGF,可显著下调ADAM9等表达水平,进而显著抑制NSCLC细胞侵袭生长,揭示HDGF-ADAM9等新的信号转导途径.HDGF蛋白等在入NSCLC组织中高表达,其高表达代表预后不良,HDGF可以作为手术切除NSCLC预后判定、术后分子分期、指导是否选择术后化放疗中等新的分子标志物；HDGF可成为肺癌分子靶向治疗的新靶标.
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