来源于北极产黄青霉新的抗真菌活性蛋白的分离纯化和鉴定

来源 :2013中国极地科学学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuntaos
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  本文从北极海域沉积物样品中的分离得到一株产黄青霉Penicillium chrysogenum,并命名为产黄青霉A096菌株.A096菌株的发酵液上清能够抑制几株植物病原真菌菌丝的生长,其发酵液上清经硫酸铵沉淀和离子交换柱层析之后分离得到一个新的抗真菌蛋白(Pc-Arctin).采用MALDI-TOF-TOF-MS鉴定了该蛋白性质,进而克隆了编码Pc-Arctin蛋白的基因,该基因长195个核苷酸,其推断的氨基酸序列包含有质谱分析得到的肽段序列.纯化的Pc-Arctin对宛氏拟青霉、长柄链格孢和绿色木霉均具有抑制活性,其最小抑制浓度(MIC)分别为24,48和192ng/片.Pc-Arctin对蛋白酶K最为敏感,其次为胰蛋白酶,但对木瓜蛋白酶不敏感.Pc-Arctin具有很好的热稳定性同时能够耐受一些常见的表面活性剂,如SDS等.二价阳离子,如Mn2+,Mg2+,和Zn2+能够抑制Pc-Arctin的抑菌活性.红细胞凝集实验结果显示,Pc-Arctin不能凝集来自兔、大鼠和豚鼠的红细胞,对这些动物的红细胞也没有溶血活性.因此,从北极产黄青霉A096中分离得到Pc-Arctin可能为一种新的抗真菌蛋白,并显示出在植物病原真菌防治中的应用潜力.
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