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【目的】自噬是一种与自体吞噬过程有关的新的细胞死亡形式,不同于凋亡和坏死。很多生物学家将自噬称为Ⅱ型程序性细胞死亡,并且发现自噬在细胞的生长、发育和疾病发生过程中起着重要作用。自噬在调控癌症细胞生存中扮演一把双刃剑的角色,它不仅是癌症细胞的一种生存机制,同时在机体清除癌症细胞的过程中也发挥了重要的作用。现已证明营养饥饿、内质网应激等多种因素都可以引起细胞自噬。内质网应激能够调节机体完整的蛋白合成过程,它还可以通过诱导LC3Ⅱ和Beclin-1的表达而引起自噬小体的形成。毒胡萝卜素是一种不可逆性内质网钙ATP酶抑制剂,在多种细胞能够引起内质网应激介导的细胞自噬。因此,本实验旨在探讨毒胡萝卜素诱导的内质网应激对肝癌HepG2细胞自噬的影响及其作用机制。【方法】体外培养肝癌HepG2细胞,经不同浓度TG干预24小时和同一浓度TG作用不同的时间,MTT检测细胞存活率。在生长对数期用0.5μM的TG分别处理0 h、6 h、12 h、24 h、36 h、48 h和不同浓度TG(0.5μM、1μM、2μM、4μM、8μM)处理24小时诱导HepG2细胞,MDC自噬特异性染料进行荧光染色检测自噬泡,了解TG诱导细胞自噬的作用,同时应用免疫印迹法检测ATF6和IRE1的蛋白表达以确定内质网应激的发生。应用免疫印迹法检测Beclin-1,LC3-Ⅱ和p38 MAPK的蛋白表达情况。【结果】TG对HepG2细胞系的生存活性有抑制作用,并且随给药时间和给药浓度的增加,抑制作用越显著。经不同浓度TG作用24小时和同一浓度不同时间处理的HepG2癌细胞可见明显聚集的点状MDC阳性荧光颗粒聚集在细胞质相应的自噬发生区且MDC阳性细胞数的增加呈浓度和时间依赖性。免疫印迹法结果显示,TG诱导HepG2细胞内质网应激介导自噬的过程中出现了ATF6、IRE1、Beclin-1、LC3-Ⅱ的表达,且蛋白水平在一定的条件下,随着处理时间和浓度的增加,表达量也增加。但p38 MAPK的蛋白表达量却随着处理时间和浓度的增加而减少。【结论】TG可以诱导内质网应激介导的肝癌HepG2细胞的自噬,其机制可能与p38 MAPK信号通路有关。