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目的:观察急性运动、长期耐力运动、长期大强度间歇性运动,对鸡卵白蛋白上游启动子转录因子COUP-TF Ⅰ、Ⅱ基因或蛋白表达的影响,为耐力运动改善骨骼肌胰岛素抵抗以及2型糖尿病提供新的分子依据.方法:40只雄性SD大鼠,体重120±5g,随机分成安静组(Con)、急性耐力运动组(AE)、长期耐力运动组(ET)、长期间歇性运动组(SIT),每组10只;12只GK大鼠,体重250±5g,随机分成安静组(GKC)、长期耐力运动组(GKE),每组6只.分笼饲养,每笼3~5只,自由饮食,自然昼夜节律变化光照.急性耐力运动组仅在处死前进行一次跑台运动,跑速13~16m/min,时间60min,运动后即刻处死取材.长期耐力运动组进行为期6周的跑台运动,跑速13~16m/min,前2周每日运动40min,后4周每日60min,每周训练6天,最后一次训练后休息一日取材;GK大鼠的长期耐力运动方案、取材时间与SD大鼠完全相同.长期间歇性运动组每天进行9次10s极量强度(≥42m/min)的跑台运动,分3组进行,每组3次,次间间歇30-60s,组间间歇3min,持续6周,最后一次训练后休息一日取材.所有大鼠空腹采血,检测血糖、血浆胰岛素、血浆脂联素、糖化血红蛋白和糖化血清蛋白.大鼠处死后20min内取完整腓肠肌,液氮冻存,采用实时荧光定量PCR检测骨骼肌COUP-TF Ⅰ和COUP-TF Ⅱ基因表达,Western Blotting检测COUP-TF Ⅰ蛋白表达.SD大鼠实验数据采用SPSS统计学软件包进行one-way ANOVA检验,GK大鼠实验数据进行T检验,显著性水平为P<0.05,非常显著性水平为P<0.01.结果:(1) GKE组大鼠血糖、糖化血清蛋白、胰岛素抵抗指数显著低于GKC组(P<0.05),血浆脂联素显著高于GKC组(P<0.01);(2)AE、ET、SIT组COUP-TF Ⅰ mRNA表达显著高于Con组(P<0.05),AE、ET、SIT组COUP-TFII mRNA表达显著低于Con组(P<0.05),GKE组COUP-TF Ⅰ、Ⅱ的mRNA表达显著低于GKC组(P<0.05); (3) GKE组COUP-TF Ⅰ蛋白表达显著低于GKC组(P<0.01);(4)相对内参基因β-actin的表达水平,COUP-TFII在骨骼肌中的表达水平比COUP-TF Ⅰ高出1000倍之多(P<0.01).结论:(1) COUP-TF Ⅰ和COUP-TF Ⅱ在基因转录水平参与了骨骼肌对急性耐力运动的快速应答,也参与了骨骼肌对长期耐力训练、间歇性大强度训练的慢性适应.运动可能倾向于激活骨骼肌COUP-TF Ⅰ基因表达,并抑制COUP-TFⅡ基因表达.(2)长期耐力运动导致GK大鼠骨骼肌COUP-TF Ⅰ mRNA及蛋白表达下调、COUP-TF Ⅱ mRNA表达下降,表明COUP-TF Ⅰ和COUP-TF Ⅱ可能参与了耐力运动改善骨骼肌胰岛素抵抗以及2型糖尿病的分子过程.(3)与COUP-TFI相比,在正常生理和糖尿病病理条件下,COUP-TF Ⅱ基因表达对耐力运动的适应特征完全一致,COUP-TFⅡ在骨骼肌中表达占据主导地位,表明运动对COUP-TF Ⅱ基因表达的抑制在胰岛素抵抗的预防和改善中可能发挥更重要的作用.