【摘 要】
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本文采集家禽喉气管作为检测样品，用甲型流感病毒M基因检测引物进行RT-PCR检测，确定样品为甲型流感病毒感染。用已建立的PCR法检测H5、H9亚型及新城疫结果为阴性。在9日龄
【机 构】
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云南农业大学,云南昆明,650220
【出 处】
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第六届南京农业大学畜牧兽医学术年会——猪禽疫病综合防控研讨会
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本文采集家禽喉气管作为检测样品，用甲型流感病毒M基因检测引物进行RT-PCR检测，确定样品为甲型流感病毒感染。用已建立的PCR法检测H5、H9亚型及新城疫结果为阴性。在9日龄鸡胚中进行病毒分离培养，收集48 h后死亡鸡胚尿囊液进行血凝和血凝抑制试验，有血凝效价但不能被H5、H7、H9和新城疫阳性血清抑制。为进一步确定病毒的亚型，用甲型流感病毒血凝素基因通用引物进行RT-PCR扩增、克隆及测序，将测得的HA基因序列与血凝素亚型标准序列进行比对，同源性为34.9%～87.3%，与H4亚型的同源性为87.3%；设计神经氨酸酶基因测序引物，将所测序列与神经氨酸酶亚型标准序列进行比对，同源性为47.7%～90.8%，与N6亚型的同源性高达90.8%.通过进行HA和NA基因序列比对，可以确定试验所分离到的2株甲型流感毒株为H4N6亚型禽流感病毒。
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