磁性甲壳素纳米纤维复合材料固定化酶的研究

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本研究开发了一种具有生物相容性的新型磁性甲壳素纳米纤维复合材料(MCNC),并将其作为酶固定化的载体应用于酶的固定化中,选用糜蛋白酶(CT)来衡量其固定化性能。甲壳素通过四甲基哌啶氮氧化物(TEMPO)介导的氧化反应形成甲壳素纳米纤维(CNFs),与磁珠结合完成磁性修饰后形成磁性甲壳素纳米纤维复合材料可用于共价固定酶,通过加入交联剂戊二醛,可进一步提高固定化酶的性能。通过透射电镜和傅里叶变换红外光谱对甲壳素纳米纤维进行表征,结果表明甲壳素被成功制备,且在固定化糜蛋白酶后表现出了杰出的性能。在60℃下孵育3小时后,共价固定和交联固定的糜蛋白酶分别剩余51.6%和70.7%的酶活,而游离糜蛋白酶只剩余29.6%的酶活;在储存20天后,共价固定和交联固定的糜蛋白酶分别剩余85.7%和84.9%的酶活,而游离酶只有18.8%。当在共价固定糜蛋白酶的基础上再使用交联剂进行交联,酶的固定量可增大6.3倍。此外,该磁性甲壳素纳米纤维材料具有良好的顺磁性,可在外加磁场的作用下与反应体系迅速分离。
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