目的：建立同时测定血浆中阿糖胞苷和阿糖尿苷浓度的高效液相色谱法。从而为临床测定血药浓度提供理论依据。方法：采用反相高效液相色谱法，色谱柱：XTerra C18(4.6mm×250mm，5μm);流动相：0.01 mol·L-1的磷酸盐缓冲液(pH=6.0);检测波长：280nm;流速：0.95 ml·min-1;柱温：30℃。结果：阿糖胞苷血药浓度在0.25～21.74mg·L-1范围内线性关系良好，检测限为0.1 mg·L-1，日内、日间RSD小于5.0％和8.0％;阿糖尿苷血药浓度在0.99～86.96mg·L-1范围内线性关系良好，检测限为0.4 mg·L-1，日内、日间RSD小于5.0％和8.0％。阿糖胞苷及阿糖尿苷平均提取回收率高于96.0％。结论：本方法简单、快速、准确，适用于临床上阿糖胞苷和阿糖尿苷的血药浓度监测及药动学研究。