【摘 要】
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目的 建立定量检测抗PT、FHA和Pm抗体的ELISA方法.方法 分别应用纯化的百日咳毒素(PT)、丝状血凝素(FHA)和百日咳粘附素(Prn)作为包被抗原,百日咳血清抗体国际参考品为标准品,建立定量检测抗PT、FHA和Pm抗体的ELISA方法.结果 建立了三种定量检测ELISA方法,并进行方法学验证,结果显示定量检测抗PT抗体的ELISA方法的最低检测限度为1.31IU/ml,批内和批间变异系数
【机 构】
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中国药品生物制品检定所血清室 北京100050
【出 处】
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2010年中国药学会大会生物制品研发新进展论坛暨生物制品专业委员会筹备会议
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目的 建立定量检测抗PT、FHA和Pm抗体的ELISA方法.方法 分别应用纯化的百日咳毒素(PT)、丝状血凝素(FHA)和百日咳粘附素(Prn)作为包被抗原,百日咳血清抗体国际参考品为标准品,建立定量检测抗PT、FHA和Pm抗体的ELISA方法.结果 建立了三种定量检测ELISA方法,并进行方法学验证,结果显示定量检测抗PT抗体的ELISA方法的最低检测限度为1.31IU/ml,批内和批间变异系数分别为9.99％和11.55％,回收率为97.19％；检测抗FHA抗体方法的最低检测限度为1.02IU/ml,批内和批间变异系数分别为11.01％和12.76％,回收率为101.20％；检测抗Prn抗体方法的最低检测限度为0.51IU/ml,批内和批间变异系数分别为9.00％和11.18％,回收率为107.83％；本研究建立的ELISA与国外同类方法对30份血清样本分析,检测结果无显著性差异.应用上述建立的三种ELISA法检测分析三组份无细胞百日咳疫苗基础免疫接种后免疫原性分析.结论 本研究建立的百日咳血清抗体检测ELISA方法的准确度高和重复性好,无需特殊仪器,适合于广大实验室的开展,可用于无细胞百日咳疫苗接种后效果观察和百日咳流行病学研究.
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