【摘 要】
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硝基呋喃类药物在动物体内代谢迅速,其代谢物为非法添加的监控对象.为了建立一种灵敏、便捷的检测呋喃妥因代谢物1-氨基-乙内酰脲(AHD)方法,本研究将呋喃妥因代谢物AHD分
【机 构】
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中国水产科学研究院珠江水产研究所,广州,510380
【出 处】
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中国水产学会鱼病专业委员会第七次会员代表大会暨学术讨论会
论文部分内容阅读
硝基呋喃类药物在动物体内代谢迅速,其代谢物为非法添加的监控对象.为了建立一种灵敏、便捷的检测呋喃妥因代谢物1-氨基-乙内酰脲(AHD)方法,本研究将呋喃妥因代谢物AHD分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)耦联,经质谱扫描、紫外光谱扫描和SDS-PAGE鉴定,成功合成了免疫抗原CPAHD-BSA和包被抗原AHD-GA-cOVA.应用杂交瘤技术将免疫鼠脾细胞与SP2/O细胞融合,建立了分泌抗CPAHD单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株,经有限稀释法进行多次亚克隆,获得稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为E7.使用本细胞株制备的腹水对CPAHD的半抑制浓度(IC50)为0.3ppb,对呋喃妥因原药的半抑制浓度为3.9ppb,与同类抗生素及其代谢物未发现交叉反应,显示高度的灵敏性和特异性.采用本抗体建立的竞争酶联免疫方法可以同时进行呋喃妥因原型药物和代谢物AHD的检测,对CPAHD的检测限低于0.05ppb.
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