猪瘟病毒E2蛋白及重复抗原表位的原核表达

来源 :中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sjtwwf
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应用PCR技术扩增无信号肽和跨膜区的E2基因和E2抗原表位(QTAVSPPTLRTEVVK)的4个重复(4P),分别将其克隆入原核表达载体pMAL-P2X中,构建了重组表达质粒.重组质粒转化宿主菌后,目的蛋白均获得了表达,其中pMAL-4P在37℃条件下应用IPTG诱导后,目的蛋白以可溶形式表达,存在于细胞裂解上清中,pMAL-E2在20℃条件下应用IPTG诱导后,目的蛋白以细胞裂解上清和包涵体形式表达.将所表达的目的蛋白应用亲和层析的方式进行了纯化,纯化的蛋白经ELISA和western-blotting检测,具有反应原性.
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