【摘 要】
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海参体壁胶原纤维具有极端的不溶性,传统的胶原蛋白提取方法耗时长,本文采用简化的胶原纤维提取方法,从水洗、Tris-HC1缓冲液洗涤、NaOH溶液洗涤的时间或次数等方面对海
【机 构】
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大连工业大学食品学院,国家海洋食品工程技术研究中心,大连 116034
【出 处】
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中国食品科学技术学会第十届年会暨第七届中美食品业高层论坛
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海参体壁胶原纤维具有极端的不溶性,传统的胶原蛋白提取方法耗时长,本文采用简化的胶原纤维提取方法,从水洗、Tris-HC1缓冲液洗涤、NaOH溶液洗涤的时间或次数等方面对海参体壁胶原纤维的提取条件进行优化.结果显示,在海参匀浆与洗涤液比例为1∶10(m/V)及操作温度为4℃的条件下,去离子水洗涤搅拌3次,每次30 min,0.1 mol/L pH 8.0 Tris-HC1缓冲液(含5 mmol/L EDTA,0.5 mol/L NaC1)洗涤8h,0.1mol/L NaOH溶液洗涤24 h,可获得白色的海参体壁胶原纤维.采用红外分析证实该条件下获得的物质为海参胶原纤维,其提取时间由传统的7天缩短为2天.聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测得到清晰条带(116-200 kDa),利用液相色谱-质谱(LC-MS/MS)分析法进行测序得到胶原纤维部分序列(Gly-Leu-Pro-Gly-Ala-Arg-Gly-Ser-Asn-Gly-Asn-Asp-Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Arg-Gly-Phe-Asp-Gly-ProGlu-Gly-Pro-Arg),与球海胆(Paracentrotus lividus)Ⅰ型胶原蛋白前体吻合.采用高效液相色谱法对得到的胶原纤维进行氨基酸组成分析,其中甘氨酸含量为32.34％,约占总氨基酸的1/3,脯氨酸和羟脯氨酸含量分别为7.75％,5.10％.
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