目的 寻找新的血清标志物以弥补AFP在肝癌诊断中的不足具有重要意义.在前期工作中,本课题组以肝癌血清为靶标,成功筛选到一批肝癌血清适配子.本研究旨在捕获适配子的血清靶蛋白,以发现有诊断价值的肝癌新血清标志物.方法 人工合成前期工作显示特异性高的适配子,并在5端标记生物素,分别与肝癌混合血清和正常混合血清温育,加链霉亲和素磁珠再温育,磁分离磁珠,洗脱回收所捕获的血清蛋白并进行SDS-PAGE,选择肝癌血清和正常血清存在差异蛋白和蛋白捕获量较大的适配子的捕获产物冻干,进行质谱分析.Western印迹选择性分析部分肝癌血清中差异表达蛋白在肝癌血清和正常血清中的表达水平,评价各蛋白对肝癌的诊断价值.结果 选择了3个适配子(AP-HCS-9-90、AP-HCS-11-4和APHCS-9-132)进行血清靶蛋白捕获.质谱分析显示,肝癌血清和正常血清蛋白数量分别为162和100个、132和118个、152和208个,其中只表达于肝癌血清的蛋白分别为110、61和41个,根据文献报道其中与肿瘤相关的蛋白分别为12个、10个和6个.小样本(肝癌、健康对照各15例)初步评估了5个肝癌差异表达靶蛋白(arginase-1、alpha 1 antichymotrypsin、alpha 1 acid glycoprotein、CAMKIV和clusterin)在肝癌血清和正常血清中的表达水平,发现arginase-1和α1 antichymotrypsin蛋白在肝癌血清中的表达水平均高于正常血清(P＜0.05),而其他蛋白的表达水平无明显差异.大样本(肝癌、健康对照各80例)验证仍显示arginase-1和α1 antichymotrypsin在肝癌血清中的表达水平高于正常血清(P＜0.05),诊断肝癌的受试者工作特征曲线下面积(AUROC)分别为0.822和0.815.对结合珠相关蛋白(HPR)的表达进行了小样本(肝癌、健康对照各40例)验证,发现其在肝癌血清中的表达低于正常血清(P＜0.01),诊断肝癌的AUROC为0.789.结论 通过肝癌血清适配子的靶蛋白捕获和分析,发现了一批在肝癌血清与正常血清中差异表达的靶蛋白,部分对肝癌有较好的诊断价值.