中介蝮(Gloydius intermedius)广泛分布于我国西北和华北地区,是我国6种蝮蛇中毒性最强的一种蝮蛇。基于先期的毒腺转录组分析,本研究采用凝胶过滤层析、离子交换层、反相高效液相色谱(RP-HPLC)及质谱分析技术分离了其PLA2神经毒素,并检测了其神经-肌肉接头(NMJ)效应。获得了4种PLA2毒素(Gintexin-A、Gintexin-B、Gin-E6b及Gin-E6a)及其完整cDNA编码序列。有趣的是,和响尾蛇类似,Gintexin-A与Gintexin-B形成了复合物Gintexin。Gintexin能阻断大鼠膈肌肉和小鸡颈二腹肌NMJ标本,2μg/mL、10μg/mL、50μg/mL的Gintexin完全阻断小鸡颈二腹肌标本神经传导的时间分别是30±0.8min(n=3)、40±0.7min(n=3)、49±0.8min(n=3),且作用部位在NMJ突触前膜;Gintexin能造成骨骼肌损伤,在3~6h时血清肌酸激酶(CK)活性较高,Gintexin的肌肉毒性比粗毒弱,且24小时后基本回到正常水平。结论:中介蝮可能是响尾蛇类毒蛇的祖先,其蛇毒中存在神经毒素和降压毒素的共进化现象,中介蝮蛇毒中PLA2形成了异二聚体,其中一个亚基发挥毒性作用,一个亚基作为分子伴侣,可能发挥定向作用,这是在亚洲蝮属蛇毒的首次发现。