乙型脑炎病毒EⅢ结构域蛋白的表达及多克隆抗体的制备与鉴定

来源 :上海市畜牧兽医学会2013年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hanjingcj520
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
  流行性乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)是由乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)引起的以中枢神经系统发生病变为主的急性、人畜共患的自然疫源性疾病.该病的流行给养猪业造成巨大的经济损失.JEV主要结构蛋白E由3个结构域(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)组成,其中结构域Ⅲ独立地在病毒表面折叠成为免疫球蛋白样结构,存在多个抗原中和表位,其诱导产生的中和抗体能够阻断JEV进入宿主细胞.本研究利用大肠杆菌表达系统,成功融合表达了JEV EⅢ结构域蛋白,并免疫小鼠制备了多抗血清.Westem-blot结果显示,此多抗能与重组的原核表达蛋白及JEV全病毒蛋白发生特异性反应.IFA检测多抗与细胞内的JEV反应原性,感染病毒组细胞质内呈现强烈荧光,对照组无特异性荧光出现.用空斑减少中和实验检测制备多抗的中和抗体效价达到1∶160.以上数据证明本研究表达的原核表达蛋白具有较好免疫原性,制备的多抗具有较好的反应原性.较有价值的是该抗体具有较高中和抗体效价,本研究制备的多抗将为研发JEV诊断试剂盒及研究JEV E蛋白功能提供了有益实验材料.
其他文献
为选择适宜培育杨树大径级工业用材林的优良品种,以生产中广泛应用和新选育的52个黑杨派杨树无性系为材料,进行多点、多年造林试验,对生长量、形质指标、木材材性、性状遗传、抗虫性、抗逆性等性状,采用单性状评价、多性状综合选择,结果表明:优良无性系的材积生长量超过对照I-69杨13.8%~82.0%,各无性系间在生长、干形、冠形、木材材性、抗病虫性、抗逆性等方面存在广泛的遗传变异,且性状受强度或中等遗传控
采用BP34000精密天平等仪器对喷施不同浓度(10mg·L-1、20mg·L-1、40 mg·L-1)“施丰乐”溶液(对照喷施清水)的当年生盐肤木和火炬树的实际蒸腾耗水状况进行研究,得出不同处理苗木在正常水分条件下及干旱胁迫过程中的日蒸腾耗水规律.结果表明:在正常水分和轻度干旱胁迫时期,各处理苗木耗水量和耗水速率日变化规律呈明显的“单峰型”变化,峰值出现在12:00~14:00之间,进入中度和严
通过分析与植被建设有关的概念、原理和原则,首次提出了植被构建的概念,阐述了植被构建需要依据的8个基本原理,即生态演替原理、生态适应性和适宜性原理、物种共生原理、生态位原理、种群密度制约原理、限制因子理论、生物多样性原理和系统协同原理。归纳出了植被构建应当遵循的9项基本原则,它们分别是:生态区适应原则;适地适树、适地适林和适地适植被原则;植物群落稳定性原则:合理密度原则;最小风险与最大效益原则;科学
2010-2011年我国境内的猪流行性腹泻(PED)大流行给我国养猪业造成重大经济损失.因疫苗免疫无法控制疫病流行,因此学者普遍认为猪流行性腹泻病毒(PEDV)出现了新的变种.本文综合分析了这个时期国内学者PEDV分子流行病学的研究结果,又对国内新近分离的PEDV的11个毒株的全基因序列进行遗传进化分析,进一步确定了国内暴发流行的PEDV毒株已远离中国86年分离的毒株和欧洲毒株CV777,成为了一
会议
猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)主要是通过与宿主细胞表面的特异性受体结合,利用细胞的内吞作用而感染易感细胞.本文对猪繁殖与呼吸综合征病毒相关受体的研究进行了综述,迄今已报道了五种独立的但功能相关的受体:硫酸乙酰肝素、唾液酸粘附素、波形蛋白、CD163和非肌肉肌动蛋白 ⅡA.对受体的功能特性进
会议
本文通过对上海地区高职畜牧兽医类近五届部分毕业生共300人进行调查和分析结果,发现该类毕业生专业就业对口率随毕业年限呈下降趋势,就业领域出现由传统畜牧兽医行业向依靠城市发展的宠物行业和实验动物行业转变的新现象;工资水平集中在3000-5000元之间,行业成长较慢;毕业生对创业的热情较高,但仅有不到5%创业成功。文章建议在提高学生实践能力的同时,提出从新生入校开始进行系统科学的职业规划教育和就业指导
会议
为研究大肠杆菌热敏性肠毒素(Escherichia coli Heat-Labile Enterotoxin,LT)蛋白佐剂(野生型、突变型)对免疫小鼠体内细胞因子表达水平的影响.建立了检测干扰素(IFN-r)的荧光定量PCR方法,并检测了经LT滴鼻免疫小鼠脾脏中IFN-r mRNA表达水平.结果表明,野生型和突变型LT蛋白免疫小鼠脾脏中IFN-r的mRNA水平呈时间依赖性升高,而PBS对照组没有
会议
本研究以不同浓度的甲醛溶液在不同温度下采用不同时间灭活鸽副黏病毒Ⅰ型(S-1株)病毒液,通过测定灭活效果及其灭活后对抗体阴性鸽的安全性,最终确定甲醛溶液的加入浓度为0.2%,灭活温度为37℃,灭活时间为24h.通过测定不同水油比乳化获得的鸽副黏病毒Ⅰ型灭活疫苗(S-1株)的稳定性,确定该疫苗的水油乳化比为1∶4.
会议
为增强日本脑炎病毒表位疫苗的免疫原性,提高其免疫效果.本研究将日本脑炎病毒(JEV)E蛋白中编码的B细胞表位(aa150-156,aa307-316,aa327-333,aa386-399)及T细胞表位(aa60-68,aa436-445)序列连接于猪细小病毒(PPV)vp2的5端,并插入到原核表达质粒pColdⅠ中,构建成重组质粒pMEP-VP2,转化大肠杆菌BL21 (DE3),使重组蛋白ME
会议
乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)是由乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)引起的经蚊为主的虫媒传播的一种人兽共患传染病.犬感染JEV无任何临床症状,犬是否能充当JEV的宿主,将病毒间接传给人类还未见定论,犬JEV感染率及对人的潜在威胁不容忽视.本实验以宠物犬为研究对象,监测了其体内在自然感染条件下JEV中和抗体随流行季节的变化规律
会议