【摘 要】
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依据已得到的银杏查尔酮合成酶(GbCHS)基因cDNA序列设计引物，分别构建了该基因的正义、反义表达载体，并通过根癌农杆菌介导法转入烟草中，对获得的抗性烟草进行PCR鉴定、Sout
【机 构】
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CollegeofHorticultureScience,HebeiAgriculturalUniversity,Baoding071001;CollegeoflifescienceandEngine
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依据已得到的银杏查尔酮合成酶(GbCHS)基因cDNA序列设计引物，分别构建了该基因的正义、反义表达载体，并通过根癌农杆菌介导法转入烟草中，对获得的抗性烟草进行PCR鉴定、Southern杂交分析、Northern杂交分析、总黄酮含量测定和黄酮提取物的高效液相色谱分析( HPLC).结果表明，正义和反义GbCHS基因均已整合到烟草基因组中，转基因烟草的黄酮含量均发生了明显变化.其中转正义基因烟草除了一个株系其余株系总黄酮含量均比对照烟草有了不同幅度的提高，最高的提高了7.68倍，最低的提高了1.273倍；转反义基因烟草总黄酮含量均比对照植株低.对烟草叶片黄酮提取液进行HPLC分析时发现，与对照烟草黄酮提取液色谱峰形相比，转正义GbCHS基因烟草发生了明显的变化，产生了对照烟草中未明显检测到的两个新的色谱峰，而转反义GbCHS基因烟草黄酮提取液色谱图峰形未发现明显改变.GbCHS转基因烟草研究为下一步利用该基因转化其他经济作物，提高其黄酮含量研究提供了试验依据.
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