目的:番茄溃疡病是导致番茄大幅减产的最重要细菌性病害,严重影响番茄的产量和品质.种子带菌是该病大规模流行和远距离传播的最主要途径,种子上携带的微量病菌就可以引起该病的大规模流行.由于种子的带菌率较低,传统的种子检测方法常常导致微量病菌被漏检,不能满足种子带菌检测的要求.因此,建立一种准确、快速、灵敏的番茄种子带菌检测方法,对有效阻止有害生物入侵和蔓延具有重要的科学意义和实用价值. 方法:采用不经过病原富集的方法如免疫学和分子生物学方法中的酶联免疫吸附法(ELISA),直接PCR{Direct-PCR)、巢式PCR(Nested-PCR)直接对番茄溃疡病菌纯菌液和模拟带菌种子提取液进行检测，并与经过病原富集后再结合PCR技术如膜过滤PCR,BIO-PCR，以及将免疫学富集和PCR技术结合起来的硝酸纤维素膜PCR、免疫捕捉PCR(IC-PCR)和免疫磁珠分离PCR(IMS-PCR)等检测方法进行比较，并从检测灵敏度、检测周期，检测稳定性及检测成本等角度对上述方法进行评价。 结果:免疫学方法如ELISA在梯度稀释的纯菌液和模拟带菌种子提取液中的检测灵敏度均为lO6CFU/ml。单纯的分子生物学方法如Direct-PCR和Nested-PCR在纯菌液中的检测灵敏度分别为10CFU/ml和lO2CFU/ml，在模拟带菌种子提取液中的检测灵敏度分别为lO6CFU/ml和104CFU/ml。 结论:将免疫学富集和分子生物学技术结合起来的IC-PCR和IMS-PCR由于其检测灵敏度高，检测周期短，可适应快速、准确的检测要求，具有更大的推广应用价值。