组织蛋白酶D对炎症牙周组织的影响研究

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目的:检测组织蛋白酶D(Cathepsin D,CTSD)在健康及炎症人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblasts,hPDLCs)中的表达情况,以使进一步探讨其在人牙周膜成纤维细胞增殖,迁移及凋亡过程中所产生的作用。方法:酶消化法分离培养hPDLCs,并对细胞进行波丝蛋白、角蛋白染色,鉴定细胞来源。用检测CTSD在牙龈卟啉单胞菌脂多糖刺激hPDLCs后及对照组hPDLCs mRNA水平的表达,检测CTSD在牙龈卟啉单胞菌脂多糖刺激hPDLCs后及对照组hPDLCs蛋白水平的表达。CCK-8法检测两组hPDLCs细胞增殖抑制率。划痕实验检测两组hPDLCs细胞迁移能力。流式细胞法检测CTSD对hPDLCs凋亡的影响。结果:经实时定量PCR法和Western blot法的检测后结果表明,与对照组相比,经牙龈卟啉单胞菌脂多糖刺激后的hPDLCs,CTSD表达升高,增殖及迁移水平均降低。流式细胞法显示CTSD促进hPDLCS的凋亡。综上所述,慢性牙周炎使CTSD表达增高,CTSD抑制细胞增殖和迁移,促进细胞凋亡。结论:CTSD在健康及炎症牙周组织中表达水平不同,其在炎症牙周组织症表达升高,且可抑制人牙周膜成纤维细胞的增殖,迁移及凋亡。
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