雷公藤叶片总RNA提取方法研究

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本文分别以3年生雷公藤实生苗幼嫩叶片以及雷公藤组培苗为提取材料,采用CTAB、CTAB-LiCl、CTAB-Trizol、Trizol、天根试剂盒以及百泰克试剂盒等6种方法,对雷公藤叶片总RNA的提取方法进行了研究.结果表明:CTAB法、CTAB-LiCl法得到的总RNA完整性较好,但CTAB法得到的实生苗和组培苗的总RNA均存在DNA残留,CTAB-LiCl法提取的总RNA得率不高;CTAB-Triol法、Trizol法、百泰克试剂盒得到的RNA完整性不高,CTAB-Trizol法、Trizol法受Trizol试剂成分的影响,OD260/OD230极低,胍类等盐分残留严重,百泰克试剂盒提取的RNA有DNA污染,存在降解;天根试剂盒不适用于雷公藤叶片的RNA提取;而从实验材料上看,实生苗比组培苗包含更多的内含物及信息量,得到的总RNA较多.
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