【摘 要】
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目的构建能在哺乳动物细胞中表达融合蛋白 P311-RFP(红色荧光蛋白)的重组载体,并进行细胞内定位研究。方法将重组载体 pCMV—Myc—p311中的目的片段 P311定向克隆至红色荧光
【机 构】
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第三军医大学西南医院全军烧伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室;
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目的构建能在哺乳动物细胞中表达融合蛋白 P311-RFP(红色荧光蛋白)的重组载体,并进行细胞内定位研究。方法将重组载体 pCMV—Myc—p311中的目的片段 P311定向克隆至红色荧光蛋白真核表达载体 pDsRed1—N1中,转染人293细胞后,激光共聚焦显微镜下观察结果。结果构建好的重组载体 pDsRed—p311经双酶切鉴定正确,在293细胞中能表达融合蛋白 P311-RFP, 激光共聚焦显微镜观察表明 P311-RFP主要分布在胞浆和胞核中。结论成功构建了 P311-RFP 融合蛋白真核表达重组载体,在哺乳动物细胞中进行了表达与细胞内定位观察,从而为 P311的细胞内定位研究提供了一个重要工具。
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