【摘 要】
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为了得到高效表达人溶菌酶的猪，本文分别构建了两个由beta-casein启动子指导的特异在乳腺表达人溶菌酶的表达载体pBC-hLY和pBC-sighLY，利用脂质体转染法获得转基因细胞系然后进行核移植获得了转人溶菌酶基因的猪。用PCR和Southern Blot的方法确定整合外源基因的阳性猪。人溶菌酶的表达情况利用WesternBlot对转基因猪的乳样进行表达检测。最后抑菌实验用于检测重组人溶菌酶
【机 构】
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中国农业大学农业生物技术国家重点实验室，北京 100193 北京济普霖生物技术有限公司，北京 10
【出 处】
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第十五次全国动物遗传育种学术讨论会
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为了得到高效表达人溶菌酶的猪，本文分别构建了两个由beta-casein启动子指导的特异在乳腺表达人溶菌酶的表达载体pBC-hLY和pBC-sighLY，利用脂质体转染法获得转基因细胞系然后进行核移植获得了转人溶菌酶基因的猪。用PCR和Southern Blot的方法确定整合外源基因的阳性猪。人溶菌酶的表达情况利用WesternBlot对转基因猪的乳样进行表达检测。最后抑菌实验用于检测重组人溶菌酶的生物活性。
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家禽的肌内脂肪含量被认为与肉质及口感呈正相关，影响肉质的嫩度、风味和多汁性;而肌昔酸是重要的风味物质，对肌肉的鲜味程度起着巨大作用。清远麻鸡属于小型优质肉用鸡种，素以皮色金黄、肉质嫩滑、皮脆爽、骨软、风味独特而驰名粤港澳市场，但目前对于清远麻鸡优良肉质形成的分子机理还未进行过系统的研究。连接酶检测(LDR)反应是一种基于耐高温连接酶的SNP快速检测技术。本研究采用LDR方法在清远麻鸡中研究对肌内脂
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过氧化物酶体增殖物激活受体a(PPARa)是一类由配体激活的核转录因子，属核激素受体超家族成员，可以激活脂肪酸转运蛋白和脂肪酸转运酶，完成脂肪酸向肝脏的转运，上调长链脂肪酸基因的表达，形成脂酸辅酶A，还通过调控线粒体β氧化途径来影响能量平衡等。另外，PPARa除了能够调控脂类代谢中的许多重要酶类之外，还能调控脂蛋白的代谢。本研究以鸡PPARa基因作为影响脂肪性状的候选基因，旨在探讨该基因多态性与脂
基因组扫描首先应用大量的标记在具有完整性状记录、群体数量大的资源家系进行标记基因分型，由此建立标记连锁图谱，并在此基础上根据个体的表型数据进行标记—QTL区间定位。由于标记和QTL在不同群体中的存在状态不同，不同资源群体的定位结果也往往不尽相同。本研究以固始鸡与安卡鸡组建的F2代资源群体为基础，采用微卫星标记，对鸡的第9,10,11,13条微小染色体进行检测，寻找影响鸡生长性状、屠体性状、肉质性状
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目前鸡QTL定位的研究主要集中在微卫星全基因组扫描，虽然发现了很多和鸡各种性状相关联的QTL，但图谱的清晰度受到了很大的限制，很难对QTL区间内的相关基因进行功能鉴定和位置克隆。因此对已报道的QTL做进一步的精细定位就很重要了，本研究就是通过对鸡脂肪性状QTL区域进行进一步的精细定位，进而从中寻找影响脂肪性状的候选基因和相关分子遗传标记。
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