【摘 要】
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目的：建立一种用于A群、C群、W135群和Y群四价流脑结合疫苗制品中各血清群多糖蛋白结合物的定量检测方法.方法：制备了抗载体蛋白白喉毒素无毒变异体(CRM197)和流脑4个血清群多糖的特异性单克隆抗体,并建立了用CRM197特异性单抗为包被抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的流脑各血清群多糖的单抗为捕获抗体,可定量检测流脑各血清群结合物含量的双抗体夹心ELISA法.结果：定量检测A 群流脑结合物(
【机 构】
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天津科技大学 天津康希诺生物技术有限公司,天津 300457
【出 处】
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2013中国药学大会暨第十三届中国药师周
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目的：建立一种用于A群、C群、W135群和Y群四价流脑结合疫苗制品中各血清群多糖蛋白结合物的定量检测方法.方法：制备了抗载体蛋白白喉毒素无毒变异体(CRM197)和流脑4个血清群多糖的特异性单克隆抗体,并建立了用CRM197特异性单抗为包被抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的流脑各血清群多糖的单抗为捕获抗体,可定量检测流脑各血清群结合物含量的双抗体夹心ELISA法.结果：定量检测A 群流脑结合物(GAMP-CRM197)的夹心ELISA法,线性范围为3.75～120ng/ml,检测限为3.75ng/ml,回收率为90％～120％.定量检测C群结合物(GCMP-CRM197)的夹心ELISA法,线性范围为1.875～30ng/ml,检测限为0.938ng/ml,回收率为85％～115％.定量检测W135群结合物(GWMP-CRM197)的夹心ELISA法,线性范围为7.5～240ng/ml,检测限为7.5ng/ml,回收率为80％～100％.定量检测Y群流脑结合物(GYMP-CRM197)的夹心ELISA法,线性范围为1.875～60ng/ml,检测限为0.938ng/ml,回收率为90％～120％.方法变异系数CV值均小于15％.结论：本研究建立的夹心ELISA法可以用于四价流脑结合疫苗成品中各血清群结合物的定量检测.
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