水稻纹枯病菌菌核形成过程中差异表达基因的克隆与功能分析

来源 :中国植物病理学会2014年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:masterwhl
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  由立枯丝核菌(Rhizoctonia solani Kühn)引起的水稻纹枯病是世界上重要的水稻病害之一,同时也是我国水稻三大病害之一,给水稻生产造成了严重的经济损失.本研究以水稻纹枯病菌(R.solani AG-1 IA)强致病力菌株GD-118菌核形成和发育过程中三个代表性阶段的菌体(菌丝体、白色菌核、褐色菌核)为研究材料,利用cDNA-AFLP技术,获得了多个差异表达的转录衍生片段(TDFs),选择其中的20个TDFs序列进行引物设计,分别以菌丝体、白色菌核和黑色菌核的总RNA反转录合成的cDNA为模板,以3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)为参照基因,应用SYBR Green RT-PCR技术,检测差异表达基因的表达量.选择其中的一个在菌丝体阶段特异表达的磷酸甘露糖变位酶(PMM)基因,采用RACE技术,获得其cDNA全长序列.为了进一步分析PMM基因在菌核形成和发育过程中的作用,以pSilent-1质粒为载体,eGFP基因为标记,构建了沉默表达载体,利用原生质体PEG介导法,将其导入到水稻纹枯病菌野生型菌株中,对所得的沉默表达转化子进行表型分析,探明PMM基因在菌核形成和发育过程中的作用.通过以上研究,试图阐明水稻纹枯病菌菌核形成和发育过程中基因表达调控的分子机理,为制定新型的水稻纹枯病防治策略奠定基础,因而具有重要的理论和实践意义.
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