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目的 猪苓是临床上常用中药材之一,性甘味淡,归肾、膀胱经,主利尿渗湿的功效.猪苓多糖类是其主要化学成分之一.实验证明猪苓多糖对动物移植性肿瘤有抑制作用,具有辅助抗肿瘤活性.本团队前期研究发现猪苓多糖能够增加大鼠巨噬细胞的吞噬功能、体外 NO 释放及共刺激分子和表面分子CD14/TLR4、CD40,CD16/32等的表达.鉴于上述结果,本研究以巨噬细胞RAW264.7为载体,通过 IFN-γ 诱导其成为M1 亚型巨噬细胞,研究猪苓多糖对 M1 细胞的摄取功能及其可能的作用机制.目的是基于stat3通路研究猪苓多糖(PPS)对γ-干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)活化的巨噬细胞炎症模型细胞的吞噬作用及其作用机制.方法 巨噬细胞株(RAW264.7)以1× 104个/孔接种于96孔培养板,用不同浓度的猪苓多糖干预 24 h,MTT法测定细胞的存活率.RAW264.7 细胞以 2.5× 105个/孔接种于24孔培养板,将细胞分为空白组、IFN-γ 模型组、IFN-γ 加猪苓多糖组(250 μg/mL),每组 4 个复孔,给予 IFN-γ(100ng/mL)刺激 3 h,继而猪苓多糖干预24 h,中性红法测定细胞的摄取活性.1× 106个/孔接种于6孔板培养,将细胞分为空白组、IFN-γ 模型组、IFN-γ 加猪苓多糖组(250μg/mL).RAW264.7细胞给予 IFN-γ刺激 3 h,继而用猪苓多糖干预共刺激 6 h.收集细胞,Western blotting法检测细胞p38 丝裂原活化蛋白激酶(p38),细胞外信号调节蛋白激酶 42/44(ERK42/44),信号传导与转录激活因子3(stat3)和应激活化蛋白激酶(JNK)的表达.结果 与对照组相比,IFN-γ诱导模型组细胞因子 IL-1β和IL-10 mRNA 表达量显著升高(P ＜ 0.05),模型建立成功.给予猪苓多糖干预后,猪苓多糖可增加由IFN-γ诱导的巨噬细胞的形态分化,摄取活性以及蛋白p38,ERK42/44,JNK,stat3 磷酸化的表达(P ＜ 0.05).结论 猪苓多糖可以增强 IFN-γ诱导的摄取活性,猪苓多糖能够增强IFN-γ活化的巨噬细胞pp38、p-stat3蛋白的表达,提示了猪苓多糖可能通过激活P38和stat3通路提高IFN-γ活化的巨噬细胞的吞噬功能,其信号通路可能 MAPK－STAT3有关.